1、目的:(1)設(shè)計建立遠端胃癌根治術(shù)中的無瘤技術(shù)-全阻斷技術(shù)，并進一步完善該技術(shù)的手術(shù)操作流程，達到標(biāo)準(zhǔn)化操作;(2)通過動物實驗和臨床實驗評估全阻斷技術(shù)降低癌細(xì)胞術(shù)中轉(zhuǎn)移的有效性，并進行臨床隨訪，觀察該技術(shù)是否可改善胃癌患者的術(shù)后遠期生存，是否具備臨床推廣價值。
　　方法:(1)第一部分，全阻斷技術(shù)設(shè)計和動物實驗:進腹后，預(yù)先采用親水阻隔膜覆蓋腫瘤漿膜面，然后以直線縫合器沿腫瘤四周釘合胃壁與網(wǎng)膜組織使腫瘤同術(shù)野相隔離，由此完成全阻

2、斷過程;動物實驗:采用小型香豬為實驗對象，按上述方法建立全阻斷實驗動物模型，于阻斷區(qū)內(nèi)胃壁漿膜下注射納米活性炭，觀察活性炭的淋巴示蹤過程，術(shù)畢收集阻斷區(qū)和非阻斷區(qū)的胃壁及所屬淋巴結(jié)切片鏡檢。術(shù)中另于豬胃左動脈內(nèi)置管推注亞基藍溶液，觀察阻斷區(qū)內(nèi)外胃壁的染色情況，并分時收集阻斷區(qū)和非阻斷區(qū)的靜脈血，各血漿標(biāo)本固相萃取后進行高效液相色譜分析檢測血漿中的亞甲藍濃度;(2)第二部分，臨床實驗和隨訪:將復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院2009年6月至2010年

3、9月收治的符合入組標(biāo)準(zhǔn)的76例遠端胃癌病人隨機分為兩組，實驗組（阻斷手術(shù)組）40例病人完成對腫瘤部位的全阻斷后行胃癌根治術(shù)，對照組（常規(guī)手術(shù)組）36例病人則直接行常規(guī)胃癌根治術(shù)，所有病人均行D2淋巴結(jié)清掃。一方面比較兩組之間在手術(shù)時間、住院天數(shù)、術(shù)后并發(fā)癥等臨床資料方面有無差異;另一方面，兩組均于術(shù)前、術(shù)中分別抽取門靜脈血和腹腔灌洗液，實驗組術(shù)中另取阻斷區(qū)域內(nèi)的網(wǎng)膜靜脈血。采用熒光定量實時PCR測定上述標(biāo)本內(nèi)CEAmRNA和CK20mR

4、NA的表達情況，以此反映術(shù)中不同時間不同位點的游離癌細(xì)胞量，然后進行組間和組內(nèi)對比，分析手術(shù)操作是否會加劇腫瘤細(xì)胞播散以及全阻斷技術(shù)是否可以有效減少術(shù)中癌細(xì)胞經(jīng)血行和腹膜轉(zhuǎn)移。淋巴網(wǎng)阻斷效果的驗證方法與動物實驗相同;術(shù)后對實驗組和對照組病人進行跟蹤隨訪，比較兩組病人的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的形式和比例及無復(fù)發(fā)生存率(DFS)，初步評估全阻斷遠端胃癌根治術(shù)是否可使患者臨床獲益。
　　結(jié)果:(1)第一部分:課題組設(shè)計的全阻斷遠端胃癌根治術(shù)理論上可從

5、血行、淋巴道和腹膜三方面阻斷癌細(xì)胞術(shù)中轉(zhuǎn)移。動物實驗顯示胃壁局部注射納米活性炭后，活性炭顆粒沿淋巴管迅速回流，漿膜下淋巴網(wǎng)絡(luò)顯示清晰，但活性炭無法越過阻斷線;阻斷區(qū)內(nèi)的淋巴結(jié)數(shù)分鐘后明顯黑染，而阻斷區(qū)外的淋巴結(jié)始終未見黑染，胃壁及淋巴結(jié)切片的鏡檢結(jié)果與肉眼觀察結(jié)果相一致。胃左動脈推注亞甲藍后，阻斷區(qū)外胃壁明顯藍染，阻斷區(qū)內(nèi)胃壁無藍染;所有時間點阻斷區(qū)外網(wǎng)膜靜脈血中的亞甲藍濃度均遠遠高于阻斷區(qū)內(nèi)靜脈血中的亞甲藍濃度，兩者相差近千倍，說明全

6、阻斷可有效阻止亞甲藍沿動脈供血途徑進入阻斷區(qū)，同時也無法由非阻斷區(qū)沿胃壁血管網(wǎng)絡(luò)進入阻斷區(qū)。(2)第二部分:實驗組除手術(shù)時間長于對照組外，住院天數(shù)、術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率及其他臨床指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)差異。進腹后，阻斷組門靜脈血內(nèi)CEAmRNA和CK20mRNA的陽性率為10％(4/40)和15％(6/40)，常規(guī)組分別為8.3％(3/36)和11.1％(4/36)，兩組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05);術(shù)中牽拉胃癌病灶時，阻斷組門靜脈血CEAmR

7、NA和CK20mRNA的陽性率為7.5％(3/10)和15％(6/40)，常規(guī)組分別為30.5％(11/36)和36％(13/36)，兩組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);同理，于上述兩個時段分別抽取腹腔灌洗液，兩組之間的CEAmRNA和CK20mRNA的表達率均無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。實驗組阻斷區(qū)內(nèi)外網(wǎng)膜靜脈血中的CEAmRNA和CK20mRNA的陽性率均具備統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05);實驗組阻斷區(qū)內(nèi)胃壁注射納米活性炭后，阻斷

8、區(qū)內(nèi)的淋巴網(wǎng)絡(luò)明顯黑染，而阻斷區(qū)外始終無淋巴結(jié)黑染，鏡檢結(jié)果與肉眼觀察結(jié)果相一致。術(shù)后對兩組病人中位隨訪24個月，實驗組無一例復(fù)發(fā)死亡，對照組有三例出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，其中兩例死亡。
　　結(jié)論:(1)全阻斷遠端胃癌根治術(shù)能夠更全面的阻斷腫瘤部位、操作過程簡單、耗時短、附加費用低廉、對后續(xù)手術(shù)操作無影響;小香豬是模擬人類上腹部手術(shù)的理想動物模型并初步驗證了全阻斷技術(shù)可有效阻斷胃周的血液和淋巴循環(huán);(2)手術(shù)操作提高了門靜脈內(nèi)CEAmRNA