1、第一部分 新生豬胰島細胞的分離純化和培養(yǎng) 目的:探討一種簡單可行、高效的新生豬胰島細胞體外分離和培養(yǎng)的方法,為進一步胰島細胞的基因轉染創(chuàng)造條件.結論:采用低濃度的V型膠原酶分次消化,Ficoll-400密度梯度離心純化胰島細胞,可以獲得數(shù)量較多的,活力良好的新生豬胰島細胞,為進一步的實驗提供了研究材料.第二部分 新生豬胰島細胞的HLA-G<,1>轉染 目的:HLA-G基因特異性表達在胚胎絨毛外細胞滋養(yǎng)層,在維持母胎耐受方面起重要作用.H

2、LA-G<,1>基因表達NK細胞、T細胞以及樹突狀細胞的抑制性受體的配體,誘導移植免疫耐受.該實驗探討脂質體介導HLA-G<,1>基因轉染體外培養(yǎng)的新生豬胰島細胞的可行性,分析其表達狀況.結論:利用脂質體GeneJammer轉染體外培養(yǎng)的胰島細胞,可以獲得靶基因的瞬時高效表達.第三部分 轉染HLA-G<,1>的新生豬胰島細胞<'51>Cr實驗目的 探討脂質體介導的體外HLA-G<,1>基因轉染新生豬胰島細胞后,目的基因HLA-G<,1>

3、的表達對人NK細胞細胞毒的抑制作用.結論:利用脂質體GeneJammer轉染體外培養(yǎng)的新生豬胰島細胞,HLA-G<,1>轉染可以有效抑制人NK細胞對豬胰島細胞的細胞毒作用.第四部分 免疫活性細胞在獼猴接受異位豬心臟移植急性血管性排斥反應中的意義 目的:探討免疫活性細胞在異種移植急性血管性排斥反應中的意義.方法獼猴接受腹腔內異位豬心臟移植,使用高精度的CVF完全清除獼猴體內補體,獲得AVR模型.移植心遭排斥并停跳后手術切除,常規(guī)病理檢查,