1、海洋微生物生存環(huán)境特殊復(fù)雜，其次級代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)新穎、種類繁多，是新結(jié)構(gòu)活性化合物的重要來源。為了尋找結(jié)構(gòu)新穎的活性化合物，本論文采用活性追蹤的方法開展了海洋微生物的抗腫瘤活性篩選及2株深海來源真菌抗腫瘤次級代謝產(chǎn)物的研究工作。內(nèi)容包括：淺海及深海來源的真菌及放線菌的分離與抗腫瘤活性篩選；活性菌株的初步評價及抗腫瘤活性成分的追蹤分離；單體化合物的結(jié)構(gòu)解析；單體化合物抗腫瘤活性的初步評價。 從福建莆田、泉州淺海的海泥及海水樣品共8個

2、樣品中，分離得到真菌76株，放線菌57株；從采自太平洋深海海域的海水及海泥的6個樣品中，分離得到真菌29株，放線菌2株。采用海蝦生物致死法的一級篩選，并采用MTT或SRB法，以tsFT210和K562等細(xì)胞為模型進(jìn)行體外抗腫瘤活性的二級篩選，分別從淺海樣品中獲得活性菌株真菌3株、放線菌8株；從深海樣品中，分離得到活性菌株真菌7株；活性復(fù)篩并結(jié)合HPLC指紋圖譜及薄層層析化學(xué)篩選，結(jié)果有2株真菌和3株放線菌具有海蝦活性(海蝦100％死亡，

3、細(xì)胞毒活性無或弱)，8株真菌和5株放線菌既有海蝦活性又有細(xì)胞毒活性。 在考察了目標(biāo)菌株的發(fā)酵條件后，對深海來源的活性真菌c2b進(jìn)行了大量發(fā)酵。又接替本實(shí)驗(yàn)室工作，得到了深海來源真菌F-23-2乙酸乙酯層的部分浸膏。對c2b發(fā)酵產(chǎn)物和F-23-2的部分浸膏運(yùn)用溶劑萃取，薄層層析，正相、反相硅膠柱層析，LH-20凝膠柱層析，反相高壓液相等化學(xué)的分離純化手段，采用人慢性髓性白血病細(xì)胞K562為篩選模型，進(jìn)行活性追蹤分離。從F-23-2

4、的部分浸膏中分離得到9個單體化合物(1-9)；從c2b的次級代謝產(chǎn)物中分離得到11個單體化合物(10-20)共20個化合物。 繼而，利用理化性質(zhì)和波譜學(xué)方法(IR，UV，-MS，NMR，X-ray)結(jié)合化學(xué)反應(yīng)的方法闡述了其中15個化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)(化合物結(jié)構(gòu)及名稱參見Table 1)，其中4個新化合物。新化合物的結(jié)構(gòu)類型包括：2個Meleagrin類生物堿(1-2)和2個Roquefortine類生物堿(5-6)；其他的結(jié)構(gòu)類

5、型有色氨酸的衍生物2個(9，10)，甾醇類化合物3個(12-14)，苯的衍生物1個(11)，腦苷脂類化合物1個(15)。利用MTT法、SRB法，對分離獲得的單體化合物的抗腫瘤活性進(jìn)行了初步評價。從中篩選出了7個活性化合物(1，2，3，5，7，13，14)?；衔?對A549細(xì)胞具有高強(qiáng)度抑制作用，IC50值為9.9μM；對HL-60細(xì)胞具有中等強(qiáng)度抑制作用，IC50值為33.61μM?；衔?、2、5和7對A549細(xì)胞具有中等強(qiáng)度抑制作

6、用IC50值為62.5μM、32.3μM、84.5μM和14.0μM?；衔?3和14對小鼠乳腺癌tsFT210細(xì)胞具有中等強(qiáng)度的細(xì)胞毒性，IC50值分別為89.51μM and 10.4μM。 本文從海洋微生物中共分離篩選出18株活性菌株；并從兩株深海來源真菌的次級代謝產(chǎn)物中獲得4個新的生物堿類化合物；并首次報(bào)道了5個化合物(新化合物1、2、5和已知化合物3、7)的抗腫瘤活性。上述研究提供了海洋天然產(chǎn)物的新結(jié)構(gòu)，為抗腫瘤新藥的