1、背景:
　　弓形蟲是一種專性細胞內(nèi)寄生蟲原蟲,能感染所有的恒溫脊椎動物。免疫功能正常的個體感染后表現(xiàn)為慢性感染,通常是無癥狀或者是良性自限性疾病。慢性感染者一旦出現(xiàn)免疫力低下,弓形蟲隱性感染活化會導致致死性弓形蟲腦炎。弓形蟲腦炎也是免疫功能低下患者發(fā)病和死亡的一個主要原因。目前,弓形蟲腦炎的病理損傷機制仍不十分清楚。小膠質(zhì)細胞作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)駐地免疫細胞,在損傷、炎癥和病原體存的情況下被迅速激活。活化的小膠質(zhì)細胞釋放大量細胞炎癥因

2、子,這些細胞炎癥因子具有神經(jīng)毒性作用,可導致神經(jīng)元凋亡。越來越多的證據(jù)支持,活化的小膠質(zhì)細胞在很多中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中扮演至關(guān)重要的作用,然而,活化的小膠質(zhì)細胞是否參與了弓形蟲腦炎的免疫病理過程至今未見報道。我們假設(shè)小膠質(zhì)細胞在感染弓形蟲速殖子后產(chǎn)生的炎癥環(huán)境可能造成弓形蟲腦炎中神經(jīng)元的損傷。
　　目的:
　　闡明小膠質(zhì)細胞在弓形蟲腦炎免疫病理中的作用。為弓形蟲腦炎的防治提供理論和實驗依據(jù)。
　　方法:
　　本實驗

3、首先建立弓形蟲腦炎小鼠模型,利用免疫組化檢測小膠質(zhì)細胞的形態(tài),用RT-PCR和ELISA方法,對炎癥因子白介素-1β(nterleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(nterleukin-6,IL-6)和腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)表達水平進行檢測。蛋白免疫印跡和免疫熒光檢測誘導型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)蛋白的表達。為

4、了檢測神經(jīng)元的凋亡情況,同時使用原位末端標記方法,蛋白免疫印跡和免疫熒光檢測。
　　結(jié)果:
　　(1)在弓形蟲腦炎組,我們發(fā)現(xiàn)小膠質(zhì)細胞在皮層區(qū)和海馬區(qū)大量活化,IL-1β、IL-6和TNF-α表達水平增加,iNOS表達增強。神經(jīng)元凋亡水平明顯增加。
　　(2)體外實驗結(jié)果顯示,弓形蟲速殖子能夠有效誘導小膠質(zhì)細胞活化,并伴隨IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS表達增加。N2a細胞與被速殖子感染的小膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)時

5、,N2a細胞凋亡水平顯著增加。
　　(3)在體內(nèi)和體外實驗中,米諾環(huán)素(小膠質(zhì)細胞活化抑制劑)處理后能顯著減少小膠質(zhì)細胞活化和神經(jīng)元凋亡。
　　結(jié)論:
　　在本研究中,我們的結(jié)果顯示弓形蟲速殖子能誘導小膠質(zhì)細胞活化,活化的小膠質(zhì)細胞上調(diào)炎癥因子的表達,這些變化伴隨著神經(jīng)元的凋亡。處理米諾環(huán)素后,不僅抑制小膠質(zhì)細胞活化和炎癥因子的表達,同時減少神經(jīng)元凋亡。綜上所述,小膠質(zhì)細胞的活化可能在弓形蟲腦炎的病理中扮演重要作用,抑