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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:潰瘍性結(jié)腸炎(UC)是一種病因尚未完全闡明的慢性炎癥性腸病,主要臨床表現(xiàn)為腹瀉、粘液膿血便、腹痛和里急后重。導(dǎo)師據(jù)多年臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié),制定協(xié)定方蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方,其臨床療效肯定,副作用少。本課題通過蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)UC大鼠模型的干預(yù),特別是通過觀察其對(duì)T細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子(IL-8、IL-13)的影響,深入揭示蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方治療UC的作用機(jī)制,為中醫(yī)藥治療UC提供一定的理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
方法:實(shí)驗(yàn)選取健康
2、清潔級(jí)Wistar大鼠60只。將大鼠隨機(jī)分為5組:空白對(duì)照組(Nomal control group)、模型組(Model group)、柳氮磺胺吡啶組(SASP)、中藥大劑量組(Large soup group)、中藥小劑量組(Small soup group)。除空白對(duì)照組正常喂養(yǎng)外,其余四組大鼠均采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇聯(lián)合造模法誘導(dǎo)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型。造模后第3天分別給予蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方大劑量、小劑
3、量和柳氮磺胺吡啶進(jìn)行灌胃治療,觀察其療效并探討其作用機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)通過三個(gè)方面研究探討:一,觀察蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)UC大鼠一般情況、結(jié)腸組織病理形態(tài)學(xué)的影響;二,觀察蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)UC大鼠T淋巴細(xì)胞亞群的影響;三,觀察蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)UC大鼠細(xì)胞因子IL-8及IL-10的影響。
結(jié)果:
一、一般情況、肉眼及鏡下觀察結(jié)腸組織
1.一般情況
空白對(duì)照組大鼠糞便呈小球形、毛色潤(rùn)
4、澤、喜活動(dòng)、主動(dòng)覓食、反應(yīng)靈活。
模型組大鼠從灌腸后第2天開始出現(xiàn)粘液稀便,甚至血便,大鼠毛色失去光澤、脫毛、豎毛、弓背、飲食明顯減少、反應(yīng)遲緩,倦怠懶動(dòng)。
中藥大劑量組、中藥小劑量組、SASP組治療1周后大鼠排便開始成球形,膿血逐漸減少,且主動(dòng)覓食、反應(yīng)較靈活,毛色潤(rùn)澤。
2.肉眼及鏡下觀察
2.1體重
與空白對(duì)照組(310.33±10.29)相比,模型組(255.
5、91±6.29)、SASP組(284.09±7.98)、中藥大劑量組(295.83±10.33)、中藥小劑量組(269.75±7.33)體重均減輕,有顯著差異(P<0.01);與模型組大鼠相比,中藥大劑量組、中藥小劑量組、SASP組、空白對(duì)照組體重均增加,結(jié)果均有顯著差異(P<0.01)。與SASP組大鼠相比,中藥大劑量組體重增加,中藥小劑量組減低,均有顯著差異(P<0.01)。
2.2結(jié)腸組織損傷評(píng)分
與空
6、白對(duì)照組(0)相比,模型組(3.75±0.34)、SASP組(2.20±0.26)、中藥大劑量組(1.96±0.33)、中藥小劑量組(2.42±0.21)均增高;與模型組相比,中藥大劑量組、中藥小劑量組、SASP組、空白對(duì)照組均減低,結(jié)果均有顯著差異(P<0.01)。與SASP組相比中藥小劑量組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);中藥大劑量組減低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與空白對(duì)照組大鼠相比,模型組、中藥小劑量組、中藥大劑量組、SASP
7、組體重均減輕,有顯著差異(P<0.01);與模型組大鼠相比,中藥大劑量組、中藥小劑量組、SASP組、空白對(duì)照組體重均增加,結(jié)果均有顯著差異(P<0.01)。與SASP組大鼠相比,中藥大劑量組體重增加,中藥小劑量組減低,均有顯著差異(P<0.01)。
2.3結(jié)腸病理組織觀察
正常對(duì)照組大鼠結(jié)腸各層結(jié)構(gòu)清晰,間質(zhì)未見充血水腫,固有層可見毛細(xì)血管。模型組大鼠黏膜下層有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),可見充血水腫、潰瘍?cè)罴按罅垦准?xì)
8、胞為主的肉芽;中藥大劑量大鼠黏膜上皮及腺管排列整齊,其基本形態(tài)與正常組織相似;中藥小劑量及SASP組大鼠間質(zhì)充血水腫不明顯,散見少量炎性細(xì)胞。
二、T細(xì)胞亞群
CD4+:與空白對(duì)照組(2221.17±72.99)相比,模型組(2187.00±54.82)、SASP組(2163.33±40.97)、中藥大劑量組(2223.83±62.55)、中藥小劑量組(2181.67±48.91)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05
9、)。
CD8+:與空白對(duì)照組(1128.50±54.72)相比,模型組(799.83±42.04)、SASP組(938.17±25.06)、中藥大劑量組(1067.17±59.06)、中藥小劑量組(886.00±34.99)均升高,結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與模型組相比,空白對(duì)照組、SASP組、中藥大劑量組、中藥小劑量組均減低,結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與SASP組相比中藥小劑量組無差異(P>0.05)
10、;中藥大劑量組有顯著差異(P<0.01)。
CD4+/CD8+:與空白對(duì)照組(1.97±0.05)相比,模型組(2.73±0.11)、SASP組(2.31±0.08)、中藥大劑量組(2.08±0.7)、中藥小劑量組(2.47±0.13)比值均升高,有顯著差異(P<0.01);與模型組相比,空白對(duì)照組、SASP組、中藥大劑量組、中藥小劑量組比值均降低,結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與SASP組相比,中藥小劑量組比值增高
11、,中藥大劑量降低,均有顯著差異(P<0.01)。
三、細(xì)胞因子
IL-8:與空白對(duì)照組相比,大劑量組結(jié)果顯示(P>0.05),無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
IL-10:與空白對(duì)照組(0.805±0.085)相比,模型組(0.476±0.050)、SASP組(0.585±.0071)、中藥大劑量組(0.710±0.062)、中藥小劑量組(0.615±0.057)均增加,有顯著差異(P<0.01);與模型組相比,
12、空白對(duì)照組、SASP組、中藥大劑量組、中藥小劑量組均降低,有顯著差異(P<0.01);與SASP組相比中藥小劑量組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),中藥大劑量組增加,有顯著差異(P<0.01)。
結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)成功復(fù)制了潰瘍性結(jié)腸炎模型。
蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方能明顯改善UC大鼠一般情況和結(jié)腸組織形態(tài);降低CD8+計(jì)數(shù),升高CD4+/CD8+比值,從而改善T淋巴細(xì)胞亞群的比例失調(diào),調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫功能;蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方可
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