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![脂肪酸結(jié)合蛋白4對子宮內(nèi)膜上皮細胞的影響.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/a952c4d7-7df8-42f5-b466-2bf625fbfe87/a952c4d7-7df8-42f5-b466-2bf625fbfe871.gif)
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文檔簡介
1、背景:
胚胎著床是指胚泡進入子宮腔后與子宮內(nèi)膜粘附,并逐漸埋入子宮內(nèi)膜的過程,它是生殖的關(guān)鍵性調(diào)控環(huán)節(jié),著床失敗是早期妊娠丟失的主要原因。胚胎著床受到激素,細胞因子、生長因子、粘附因子及其配基等組成的分子網(wǎng)絡(luò)的精細調(diào)控,但其機制遠未闡明。我們前期實驗發(fā)現(xiàn)人子宮內(nèi)膜細胞表達脂肪酸結(jié)合蛋白4(FABP4,常被稱為aP2),利用臨床標本,進一步發(fā)現(xiàn)分泌期子宮內(nèi)膜組織表達FABP4較增生期上調(diào),蛻膜組織的FABP4表達較非妊娠期子宮內(nèi)
2、膜進一步增加;雌、孕激素分別及聯(lián)合刺激作用子宮內(nèi)膜細胞,結(jié)果顯示雌、孕激素分別作用和雌孕激素聯(lián)合作用,對FABP4的表達均有上調(diào)作用。
目的:
明確FABP4是否參與調(diào)控子宮內(nèi)膜細胞的生物學(xué)功能,觀察FABP4對子官內(nèi)膜容受性標志性因子調(diào)控作用,應(yīng)用體外粘附模型驗證FABP4是否參與對胚胎粘附和著床的調(diào)控;研究和探索FABP4是否參與胚胎著床的過程及其可能的機制。
方法:
1、Western bl
3、ot和細胞免疫熒光檢測子宮內(nèi)膜細胞lshikawa和RL-952細胞FABP4的表達;2、采用siRNA干擾FABP4基因的表達和FABP4特異性抑制劑阻斷FABP4功能,利用CCK-8法檢測細胞增殖能力,劃痕試驗檢測細胞遷移、Transwell檢測細胞侵襲力;3、采用FABP4特異性抑制劑阻斷Ishikawa和RL-952細胞FABP4功能,利用實時定量PCR檢測子宮內(nèi)膜容受因子白血病抑制因子(leukemia inhibitory
4、factor, LIF)、整合蛋白beta3(Integrin beta3,Integrin-β3)、緊密連接蛋白4(claudin4)的蛋白水平。
結(jié)果:
(1) Western blot和細胞免疫熒光顯示Ishikawa和RL-952細胞表達FABP4;
(2).靶向性siRNA干擾Ishikawa和RL-952細胞FABP4的表達和特異性FABP4抑制劑阻斷FABP4功能顯著抑制子宮內(nèi)膜細胞增殖、遷移
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