小麥遺傳轉化參數(shù)優(yōu)化及其應用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文以中國春性小麥新品種(系)為外植體,進行組織培養(yǎng)和遺傳轉化參數(shù)研究。在此基礎上,將含有bar基因和GUS報告基因的質粒pDM803用基因槍法轉化小麥,獲得可育的轉基因小麥植株,從而建立了適于中國春性小麥基因型的基因槍轉化體系。主要研究結果如下:  1.首次報道2,4,5-T和NAA對小麥愈傷組織培養(yǎng)反應的影響,特別是詳細比較了它們與小麥組織培養(yǎng)試驗中廣泛應用的生長調節(jié)物質2,4-D之間的差異?! ?.小麥幼胚愈傷組織分化頻率(6

2、2%-76.39%)高于成熟胚愈傷組織分化頻率(38.57%-47.76%)。對小麥愈傷組織進行干燥處理,適宜時間內可有效地提高外植體分化頻率?! ?.首次探討在培養(yǎng)基中添加AgNO3對普通小麥幼胚愈傷組織培養(yǎng)的影響。在培養(yǎng)基中添加適宜濃度硝酸銀可顯著提高胚性愈傷組織率和愈傷鮮重,且能降低愈傷組織褐化率。 4.抑菌試驗結果表明,頭孢霉素對小麥愈傷組織的毒性比羧芐青霉素大。 5.根據試驗結果建立了一套適宜于中國春性小麥基

3、因槍轉化程序,使外源DNA能有效地轉移到受體中,同時減少轉化中對愈傷組織的機械損傷。試驗共獲得429塊川農16抗性愈傷組織,59株再生植株。經PAT活性檢測,獲得13株抗除草劑或半抗性植株,PCR分析檢測到其中6株具有bar基因陽性預期片段,轉化效率達1.40%。 6.以成熟種子為材料進行了Basta抗性梯度試驗。隨Basta濃度增加,小麥幼苗生長受到抑制,高度明顯降低,黃化率顯著增大。Basta濃度為9mg/L的處理適宜,播種后

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