西瓜嗜酸菌趨化性測定及趨化基因cheA和cheY功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、瓜類細菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch,簡稱BFB)是世界范圍的檢疫性細菌病害,主要為害西瓜、甜瓜等葫蘆科作物,造成重大的經濟損失。西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli,Schaad et al,2008)是其病原菌,有研究表明病原細菌在寄主表面的定殖能力與其致病能力關系密切,而病原細菌的趨化能力是決定定殖能力的關鍵因素之一。本研究主要圍繞西瓜嗜酸菌的趨化性測定及其趨化基因的功能展開,主要結果如下:

2、
  1、初步測定西瓜嗜酸菌Ac-5菌株的趨化性
  利用毛細管法測定碳源、氨基酸、有機酸等對西瓜嗜酸菌趨化性的影響。結果發(fā)現(xiàn):麥芽糖、葡萄糖、乳糖、蔗糖和半乳糖顯著促進西瓜嗜酸菌的趨化性;L-亮氨酸、L-異亮氨酸、L-色氨酸、L-纈氨酸、L-脯氨酸、L-谷氨酸和L-谷氨酰胺顯著促進西瓜嗜酸菌的趨化性,而L-蛋氨酸顯著抑制其趨化性;檸檬酸和蘋果酸顯著促進西瓜嗜酸菌的趨化性;氯化鈉、硫酸鎂等對西瓜嗜酸菌的趨化性無顯著影響。

3、r>  2、Ac-5菌株趨化基因cheA和cheY的生物信息學分析
  登錄NCBI數(shù)據(jù)庫西瓜嗜酸菌全基因序列查找cheA和cheY基因的相關信息。cheA和cheY基因分別編碼CheA和CheY蛋白。CheA和CheY蛋白均存在多個疏水性氨基酸區(qū)域;CheA蛋白是一種跨膜蛋白,在600-700氨基酸處(即CheW結合區(qū)域)有跨膜結構,CheY蛋白不存在跨膜結構,是一種膜內蛋白,用于接收CheA蛋白的信號;西瓜嗜酸菌CheA蛋白與

4、青枯菌的CheA蛋白親緣關系最近,和熒光假單胞菌的親緣關系最遠。
  3、Ac-5菌株趨化基因cheA和che Y3的功能研究
  構建ΔcheA和ΔcheY3基因缺失突變株以及CcheA互補菌株,并進行表型分析。結果發(fā)現(xiàn):ΔcheA和ΔcheY3基因缺失突變株與野生型菌Ac-5相比,趨化及運動能力下降;在種子表面的定殖能力下降;病株病情指數(shù)先下降后恢復野生型菌株Ac-5水平;生物膜形成能力增強;引起非寄主煙草的過敏性反應。

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