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![黃芪注射液對(duì)大鼠睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后保護(hù)作用的研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/ecd782e5-fd82-4c59-8006-3663f268e973/ecd782e5-fd82-4c59-8006-3663f268e9731.gif)
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1、目的:睪丸扭轉(zhuǎn)是臨床急癥,好發(fā)于青春期前后的青少年,需行睪丸早期復(fù)位以挽救睪丸,然而,復(fù)位后常出現(xiàn)不同程度的睪丸萎縮乃至生精功能低下已成為亟待解決的問(wèn)題。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)生精功能損傷與復(fù)位后再灌注睪丸中活性氧的產(chǎn)生所致,活性氧族包括過(guò)氧化氫(H<,2>O<,2>)、羥基(-OH)、超氧基團(tuán)(O<,2><'->)等,它們引起細(xì)胞膜和線粒體膜脂質(zhì)過(guò)氧化,從而破壞膜的完整性,增加膜的通透性,進(jìn)而引起睪丸生精細(xì)胞損傷及凋亡<'[1]>。扭轉(zhuǎn)一側(cè)睪丸
2、除了造成患側(cè)組織的直接損傷以外,還會(huì)導(dǎo)致對(duì)側(cè)睪丸的交感性損傷<'[2]>。對(duì)側(cè)睪丸損傷的機(jī)制可能與對(duì)側(cè)睪丸的缺血再灌注、免疫因素、神經(jīng)體液因素、血睪屏障有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位動(dòng)物模型的建立,旨在探討黃芪注射液對(duì)Wistar雄性大鼠睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后的保護(hù)作用,以研究缺血再灌注(Ischemia-reperfusion)損傷過(guò)程中相關(guān)酶及產(chǎn)物等生化指標(biāo)的變化,以及生精細(xì)胞凋亡情況的變化,為臨床工作中的睪丸扭轉(zhuǎn)患者減輕睪丸損傷及保護(hù)生精功
3、能提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論依據(jù)。 方法:40只成年(6-8周)健康Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為睪丸扭轉(zhuǎn)假手術(shù)對(duì)照組(A組)、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組(B組)、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+單次黃芪注射液治療組(C組)、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+多次黃芪注射液治療組(D組)4個(gè)組,每組10只。建立單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位模型。單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位模型采用Tumer 法<'[3]>建立:2%戊巴比妥鈉(50mg/kg)腹腔注射麻醉后,下腹小切口,游離左側(cè)睪丸,切斷睪丸引帶,分離周?chē)?/p>
4、筋膜至附睪頭。A組:左側(cè)陰囊切開(kāi),游離暴露睪丸,依扭轉(zhuǎn)模型隨意搬動(dòng),但不予扭轉(zhuǎn),陰囊縫合關(guān)閉。B組:左側(cè)睪丸順時(shí)針繞精索旋轉(zhuǎn)720°,肉膜白膜縫合固定以防止自動(dòng)復(fù)位,陰囊縫合。扭轉(zhuǎn)6h后復(fù)位固定。C組:方法同B組,于扭轉(zhuǎn)復(fù)位前30min(即扭轉(zhuǎn)后5.5h)腹腔注射黃芪注射液(3g/kg)。D組:方法同B組,除于扭轉(zhuǎn)復(fù)位前 30min 腹腔注射黃芪注射液外,還分別于術(shù)后第1天、第2天、第3天腹腔注射黃芪注射液(lg/kg)。扭轉(zhuǎn)復(fù)位術(shù)后7
5、天切取雙側(cè)睪丸分別留取組織勻漿和石蠟切片的標(biāo)本待檢測(cè)。睪丸組織石蠟包埋切片用末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧尿嘧啶三磷酸原位缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)生殖細(xì)胞凋亡,光鏡下每張切片選取5個(gè)視野(×200),計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,求得陽(yáng)性細(xì)胞百分率得到凋亡指數(shù)。化學(xué)比色法測(cè)定睪丸組織的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。 以上結(jié)果均采用X±s表示,所有數(shù)據(jù)均在微機(jī)上采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用方法
6、:方差齊性檢驗(yàn)、單因素方差分析,P值<0.05定為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果:雙側(cè)睪丸均顯示:1睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+單次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組比較:SOD含量明顯升高,差異有顯著性(P<0.05);MDA含量明顯降低,差異有顯著性(P<0.05);生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低,差異有顯著性(P<0.05)。 2 睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+多次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組比較:SOD含量明顯升高,差異有顯著性(P<0.05);MDA 含
7、量明顯降低,差異有顯著性(P<0.05);生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低,差異有顯著性(P<0.05)。 3 扭轉(zhuǎn)復(fù)位+多次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+單次黃芪注射液治療組比較SOD含量明顯升高,差異有顯著性(P<0.05);MDA含量明顯降低,差異有顯著性(P<0.05);生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低,差異有顯著性(P<0.05)。 4 睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+單次黃芪注射液治療組、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+多次黃芪注射液治療組與
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