1、目的：通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究黃芪注射液對(duì)大鼠脊髓缺血再灌注模型是否具有保護(hù)作用以及保護(hù)作用的機(jī)理。
　　方法：采用Zivin法，建立大鼠脊髓缺血再灌注模型。33只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(A組，n=3)、缺血再灌注組(B組，n=15)、黃芪組（C組，n=15)。A組只進(jìn)行麻醉和開腹手術(shù)操作，不阻斷腹主動(dòng)脈，麻醉前腹腔給予0.9％氯化鈉注射液；B組麻醉前腹腔給予0.9%氯化鈉注射液，麻醉后阻斷腹主動(dòng)脈32分鐘后再灌注；C組麻醉前30分鐘腹

2、腔注射黃芪注射液，麻醉后阻斷腹主動(dòng)脈32分鐘后再灌注。再灌注2h、8h、12h、24h、48h后分別對(duì)三組動(dòng)物進(jìn)行后肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分（BBB法）。并于各個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別將三組動(dòng)物麻醉后，下腔靜脈取血4mL并切取L2-4脊髓組織進(jìn)行血清NSE、脊髓組織HE染色、測(cè)定脊髓組織中Ca2+濃度、AQP4表達(dá)及凋亡指數(shù)。
　　結(jié)果：1、大鼠后肢神經(jīng)功能BBB評(píng)分結(jié)果：模型組和黃芪組動(dòng)物清醒后均出現(xiàn)不同程度后肢運(yùn)動(dòng)障礙，模型組和黃芪組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后肢神

3、經(jīng)功能評(píng)分顯著低于空白組(P<0.05)。隨著缺血后再灌注時(shí)間延長(zhǎng)，兩組動(dòng)物后肢運(yùn)動(dòng)功能均出現(xiàn)恢復(fù)，其中黃芪組動(dòng)物后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)速度較快，而模型組動(dòng)物后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)較慢，而且在48小時(shí)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尾部功能仍不能恢復(fù)，處于垂尾狀態(tài)，在各時(shí)間點(diǎn)黃芪組后肢神經(jīng)功能BBB評(píng)分顯著高于模型組(P<0.05)。
　　2、脊髓組織HE染色結(jié)果：假手術(shù)組：400倍光鏡視野中脊髓組織結(jié)構(gòu)清晰，未見白細(xì)胞浸潤(rùn)、水腫等。神經(jīng)元細(xì)胞輪廓清晰，胞核、尼氏

4、體正常。模型組：脊髓組織水腫，結(jié)構(gòu)不清晰，有大量白細(xì)胞浸潤(rùn)，有少量紅細(xì)胞滲出，同時(shí)可見膠質(zhì)細(xì)胞增生；大量神經(jīng)元細(xì)胞退變、壞死，組織內(nèi)可見空泡形成；神經(jīng)元細(xì)胞核固縮，尼氏體消失。黃芪組：病理變化在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)明顯好于模型組，但也仍可見組織水腫，少量白細(xì)胞浸潤(rùn)，未見紅細(xì)胞滲出，膠質(zhì)細(xì)胞輕度增生；組織內(nèi)有空泡形成，但仍可見較多正常神經(jīng)元?dú)埓妫簧窠?jīng)元細(xì)胞同樣存在核固縮，尼氏體消失等變化。
　　3、大鼠血清NSE濃度檢測(cè)結(jié)果：模型組和黃芪組兩

5、組大鼠脊髓缺血再灌注后血清NSE濃度明顯高于空白組(P<0.01)；黃芪組在缺血再灌注后2h、8h、12h、24h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清 NSE濃度明顯低于模型組(P<0.01)，而黃芪組在缺血再灌注后48h血清NSE濃度高于模型組(P<0.01)。模型組在缺血再灌注后12h可見血清NSE濃度達(dá)高峰，而后逐漸回落；黃芪組在缺血再灌注后24h可見血清NSE濃度達(dá)高峰，而后逐漸回落，但回落趨勢(shì)慢于模型組，并于缺血再灌注48小時(shí)血清NSE含量高于模型

6、組。與模型組相比，黃芪組缺血再灌注后血清 NSE含量峰值低于模型組，波動(dòng)幅度小于模型組。
　　4、大鼠脊髓組織Ca2+濃度檢測(cè)結(jié)果：B、C兩組脊髓組織中Ca2+濃度在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高于A組（P<0.01），在缺血再灌注后2h、8h、12h、24h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)，C組（黃芪組）脊髓組織中Ca2+濃度低于B組（模型組），但在缺血再灌注后48h，C組（黃芪組）脊髓組織中Ca2+濃度高于B組（模型組）；其中B組在再灌注12h后達(dá)到峰值，其后逐漸

7、回落，而C組在再灌注2h逐漸上升，在再灌注后48h達(dá)到峰值，但C組峰值低于B組峰值。
　　5、蛋白免疫印跡法檢測(cè)大鼠脊髓組織 AQP4表達(dá)：模型組大鼠脊髓組織中AQP4在缺血再灌注后2-48小時(shí)5個(gè)時(shí)間點(diǎn)表達(dá)呈上升趨勢(shì)，在48h點(diǎn)達(dá)到最高峰；黃芪組大鼠脊髓組織中AQP4在缺血再灌注后8小時(shí)達(dá)到高峰，隨后逐漸降低；但模型組、黃芪組兩組脊髓組織中AQP4表達(dá)均高于空白組（P<0.01），其中黃芪組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn) AQP4表達(dá)均低于模型組

8、（P<0.01）。假手術(shù)組大鼠脊髓組織中AQP4表達(dá)在術(shù)后呈下降趨勢(shì)，并于術(shù)后12h后基本保持穩(wěn)定。
　　6、原位末端標(biāo)記法檢測(cè)大鼠脊髓中凋亡細(xì)胞結(jié)果：空白組切片顯示400倍視野內(nèi)可見神經(jīng)元細(xì)胞藍(lán)染，細(xì)胞形態(tài)正常，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰，胞質(zhì)中尼氏體存在，少量細(xì)胞核為棕黃色凋亡細(xì)胞；模型組切片400倍視野可見部分神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)尚存，但細(xì)胞核明顯染為棕黃色(凋亡早期)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)尼氏體消失，視野中也可見到明顯為棕黃色的凋亡小體(凋亡晚期)，藍(lán)

9、染的正常細(xì)胞較少見；黃芪組切片400倍視野下也可細(xì)胞核黃染的凋亡細(xì)胞，但視野內(nèi)還可見大量藍(lán)染的正常神經(jīng)元細(xì)胞。模型組、黃芪組兩組切片在400倍視野中，模型組視野內(nèi)凋亡細(xì)胞明顯多于黃芪組。三組凋亡指數(shù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果：模型組、黃芪組兩組脊髓組織中凋亡指數(shù)均高于空白組（P<0.01），但各時(shí)間點(diǎn)黃芪組脊髓組織凋亡指數(shù)低于模型組（P<0.01）。
　　結(jié)論：1、黃芪注射液對(duì)大鼠脊髓缺血再灌注損傷有明顯保護(hù)作用。
　　2、黃芪注射液可通過降