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文檔簡介
1、背景及研究目的: 鼻息肉(nasalpolyp)是一種常見鼻病,是一種鼻腔、鼻竇的慢性炎癥性疾病,形態(tài)學改變包括上皮增殖、肥厚、腺體增生、血管生成、細胞外基質(zhì)堆積及局部纖維化,其病因和發(fā)病機制尚不明確,趨于多因素病因?qū)W說和鼻通氣與鼻氣道阻力(nasalairwayresistance,NAR)學說,認為鼻息肉的形成是多種因素共同作用的結(jié)果。水通道蛋白即水孔蛋白是選擇性水通透的內(nèi)在膜蛋白。Wellner等發(fā)現(xiàn)AQP-8后證實:大多
2、數(shù)水通道以固有活性狀態(tài)存在于所分布的組織,一般不需要“門控"或其他調(diào)節(jié),從而使水代謝研究躍入了一個新的階段。已知鼻息肉是一個高度水腫的組織,組織液被稀釋,離子濃度降低,導致細胞外液滲透壓減低,水即通過水通道由組織液流向細胞內(nèi),而細胞內(nèi)的各種分子和離子自然就會沿著濃度的梯度向細胞外彌散,因而導致組織水腫。本研究采用免疫組織化學技術(shù),RT-PCR及HE染色分別觀察鼻息肉組織中細胞學特點,AQP8在鼻息肉組織及正常下鼻甲粘膜中的表達及分布,觀
3、察AQPS在鼻息肉組織和正常下鼻甲中表達的相關(guān)性,探討AQP8在鼻息肉的形成中的作用。 方法: 將實驗材料分為兩組:鼻息肉標本和正常下鼻甲粘膜,行HE染色和免疫組織化學檢測40例鼻息肉、20例正常下鼻甲AQP8的定位表達和鼻息肉組織中病理學特點。同時用TRIZOL進行mRNA提取,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測20例鼻息肉組織和18例正常下鼻甲組織中AQP8的mRNA的表達,并用凝膠圖象分析系統(tǒng)進行圖象分
4、析鼻息肉和正常下鼻甲組織AQP8表達量的變化。 結(jié)果: 一、AQP8在鼻息肉和正常下鼻甲組織中的免疫組織化學結(jié)果(一)、AQP8的定位表達情況 AQP8為1:100的一抗?jié)舛葧r可以發(fā)現(xiàn)其在鼻息肉和下鼻甲組織中不同部位有穩(wěn)定、清晰的染色反應(yīng):AQP8在正常下鼻甲組織的上皮纖毛細胞,肌上皮細胞,固有層腺體,血管均表達,但主要是表達于腺體,血管表達較少。AQP8在鼻息肉組織的上皮及固有層都有表達,但主要表達于固有層漿液
5、性腺細胞,同時固有層毛細血管及血竇內(nèi)皮細胞亦有強表達,而導管及上皮細胞表達減少。 (二)AQP8在鼻息肉和正常下鼻甲組織免疫組織化學高倍視野下手工計數(shù)各層結(jié)構(gòu)的陽性細胞表達數(shù)的變化 陽性細胞表達數(shù)結(jié)果表明:鼻息肉和下鼻甲上皮細胞層AQP8的表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);下鼻甲比鼻息肉固有腺體AQP8表達顯著減少,鼻息肉血管及血竇內(nèi)皮細胞AQP8表達比下鼻甲顯著增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 二、
6、RT-PCR分析結(jié)果 經(jīng)RT-PCR擴增后,產(chǎn)物為398bp的片段,20例鼻息肉組織中測出AQP8mRNA的表達OD值與自身內(nèi)參比值為0.95士0.03,而正常下鼻甲中僅有0.48士0.01(P<0.05)。 結(jié)論: (1)AQP8在鼻息肉中的表達較正常下鼻甲黏膜明顯上調(diào),充分考慮水通道蛋白對鼻息肉產(chǎn)生過程中水代謝的影響; (2)AQP8在正常下鼻甲組織的上皮纖毛細胞,肌上皮細胞,固有層腺體,血管均表達,
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