重組人Ⅱ型膠原250-270多肽的表達和免疫原性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究利用基因工程的方法重組、表達了人CⅡ功能性多肽CⅡ250-270(recombinant human collagen type Ⅱ peptide 250-270,rh CⅡ250-270),經(jīng)分離、純化并進一步驗證其初步具有預(yù)期的免疫學(xué)活性.該研究利用基因工程及分子生物學(xué)技術(shù)將含有人CⅡ250-270多聚基因的表達載體pGEX-4T-1(由該實驗室提供)轉(zhuǎn)化E.coliBL21工程菌,融合表達目的蛋白,經(jīng)Glutathione

2、 Spharose 4B親和層析柱分離純化,12﹪聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分析和凝膠薄層掃描測量其分子量和純度.為了進一步驗證rhCⅡ250-270是否具有同化學(xué)合成的CⅡ250-270相似的免疫學(xué)活性,該研究建立了一種用流式細胞儀同時測定T淋巴細胞增殖與細胞因子分泌的方法.為進一步探討MHCII類分子在特異性T細胞活化中的作用,該研究采用敏感性較高的特異性引物法,對RA患者和健康對照組DR4基因及其亞型進行分析.該研究構(gòu)

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