1、目的:檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子5a(Signal transducer and activatorof transcription5a,STAT5a)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子5b(Signaltransducer and activator of transcription5b,STAT5b)在非小細(xì)胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)組織和正常肺組織中的表達(dá),初步探討它們?cè)贜SCLC的發(fā)生、侵襲

2、和轉(zhuǎn)移中的作用。方法:利用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)40例NSCLC組織和20例正常肺組織中STAT5a蛋白與STAT5b蛋白表達(dá)水平。NSCLC組織均為手術(shù)切除獲得,術(shù)前未作任何放療或化療。其中,男性29例,女性11例；年齡為35—78歲,<60歲者22例,≥60歲者18例；鱗癌26例,腺癌14例；腫瘤直徑≤3cm者14例,>3cm者26例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者18例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者22例；Ⅰ-Ⅱ期者24例,Ⅲ-Ⅳ期者16例；高一中分化者30例

3、,低分化者10例。標(biāo)本組織經(jīng)福爾馬林固定,石蠟包埋,4μm厚連續(xù)切片,切片常規(guī)脫蠟水化后,蒸餾水沖洗,磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline,PBS)浸泡,高溫抗原修復(fù),3％H2O2阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性,并用正常山羊血清封閉交叉反應(yīng)。滴加一抗(STAT5a兔抗人多克隆抗體,STAT5b兔抗人多克隆抗體)孵育,PBS沖洗后滴加生物素標(biāo)記二抗孵育,PBS沖洗后滴加辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液(S-A/HRP)孵育,P

4、BS沖洗,DAB顯色,蘇木素復(fù)染,透明,封片觀察。以胞質(zhì)或胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒、網(wǎng)織狀或棕褐色團(tuán)塊為陽(yáng)性細(xì)胞。其中,STAT5a蛋白及STAT5b蛋白在NSCLC組織中的陽(yáng)性表達(dá)信號(hào)主要位于細(xì)胞質(zhì),少數(shù)位于細(xì)胞核；按每張切片的陽(yáng)性細(xì)胞比例及著色深淺劃分-、+、++、+++四級(jí),基本不著色或著色細(xì)胞少于5％為陰性(一),著色淺淡或著色細(xì)胞占5％-25％為弱陽(yáng)性(+),著色適中或著色細(xì)胞占26％-50％為中度陽(yáng)性(++),著色深或著色細(xì)胞大

5、于50％為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。結(jié)果:(1)STAT5a及STAT5b蛋白在NSCLC組織中的表達(dá)與在正常肺組織中的表達(dá)比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),在腫瘤中的表達(dá)高于正常肺組織；(2)STAT5a及STAT5b蛋白在NSCLC組織中的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小、組織分化程度及類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期無(wú)關(guān)(P>0.05)；但是STAT5b蛋白表達(dá)與性別相關(guān)(p<0.05),其女性患者表達(dá)高于男性患者(p<0.05),而ST

6、AT5a蛋白表達(dá)與性別無(wú)關(guān)(p>0.05)。(3)STAT5a及STAT5b蛋白在NSCLC組織中的表達(dá)無(wú)相關(guān)性(p>0.05),而STAT5a蛋白在NSCLC中關(guān)系比STAT5b蛋白密切。結(jié)論:(1)STAT5a及STAT5b蛋白在NSCLC中的表達(dá)增高,顯著高于正常肺組織。(2)STAT5a蛋白及STAT5b蛋白與NSCLC中的表達(dá)與患者的年齡、腫瘤大小、組織分化程度及類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期無(wú)關(guān),提示它們可能只在腫瘤發(fā)生過(guò)程中