1、本課題采用高效液相-二極管陣列檢測(cè)-飛行時(shí)間質(zhì)譜(HPLC-DAD-TOF-MS)色譜聯(lián)用技術(shù)，對(duì)六味地黃丸各種劑型進(jìn)行了定性定量研究。首先通過(guò)建立六味地黃丸化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)，結(jié)合對(duì)照品比對(duì)和HPLC-IT/MS結(jié)構(gòu)解析，對(duì)六味地黃丸的指紋圖譜成分進(jìn)行了鑒別，得到了明晰化的六味地黃丸指紋圖譜，能夠代表六味地黃丸中的色譜信息，為進(jìn)一步譜效相關(guān)性的研究建立基礎(chǔ)。同時(shí)對(duì)六味地黃丸中6個(gè)指標(biāo)性成分-沒(méi)食子酸、5-羥甲基糠醛、馬錢(qián)苷、獐牙菜苷、芍藥

2、苷和丹皮酚進(jìn)行了含量測(cè)定，對(duì)不同劑型和不同廠家中主要成分的差異進(jìn)行研究，結(jié)果表明不同劑型和不同廠家之間存在含量差異，而同一廠家的含量具有一致性。
　　 結(jié)合建立的六味地黃丸色譜分析方法，采用近紅外光譜技術(shù)，將近紅外在線檢測(cè)集成到中藥自動(dòng)化生產(chǎn)線的多個(gè)環(huán)節(jié)中，建立根據(jù)中藥內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行自動(dòng)控制的中藥生產(chǎn)質(zhì)量控制新模式，研究建立了六味地黃丸提取過(guò)程的近紅外光譜在線分析方法，建立了六味地黃丸提取過(guò)程的4個(gè)指標(biāo)成分丹皮酚、芍藥苷、馬前素和

3、沒(méi)食子酸的光譜校正模型。用此模型分析六味地黃丸提取過(guò)程，得到了比較滿意的結(jié)果。研究表明，近紅外光譜技術(shù)可用于六味地黃丸提取過(guò)程的在線分析及預(yù)測(cè)。
　　 本研究通過(guò)建立經(jīng)典的中醫(yī)模型-腎陰虛模型，采用地塞米松造腎陰虛模型，研究對(duì)下丘腦-垂體-性腺(HPG)軸平衡失調(diào)的調(diào)節(jié)作用，證實(shí)六味地黃丸能顯著地拮抗地塞米松對(duì)小鼠免疫功能的抑制。研究摘除雙側(cè)卵巢后，雌性大鼠下丘腦-垂體-卵巢(HPO)軸各環(huán)節(jié)激素水平的變化，研究了六味地黃丸不同

4、劑型對(duì)動(dòng)物內(nèi)分泌特別是生殖激素的調(diào)節(jié)具有一定療效。
　　 采用模式識(shí)別對(duì)建立的多個(gè)廠家不同劑型的六味地黃丸的指紋圖譜進(jìn)行了分析，主要運(yùn)用主成分分析(PCA)、聚類(lèi)分析(HCA)等無(wú)監(jiān)督的模式識(shí)別方法對(duì)六味地黃丸進(jìn)行分類(lèi)研究，通過(guò)應(yīng)用偏最小二乘法-判別分析(PLS-DA)進(jìn)行不同劑型和廠家的質(zhì)量評(píng)價(jià)，通過(guò)PLS-DA建立合理的模型后，發(fā)現(xiàn)5-羥甲基糠醛、莫諾苷、馬錢(qián)苷、芍藥苷、沒(méi)食子酸等成分對(duì)蜜丸和濃縮丸的分類(lèi)具有關(guān)鍵作用，故可用

5、作六味地黃丸制劑的化學(xué)標(biāo)記物，可作為質(zhì)量控制的指標(biāo)性成分和進(jìn)一步研究的方向。
　　 綜合色譜數(shù)據(jù)信息和藥效評(píng)價(jià)信息，采用LARS(LeastAngleRegressionAlgorithm)回歸算法進(jìn)行了譜效學(xué)的初步相關(guān)研究，對(duì)11個(gè)批次六味地黃丸指紋圖譜和相關(guān)免疫及內(nèi)分泌藥效數(shù)據(jù)進(jìn)行分析評(píng)價(jià)，采用該算法在指紋譜中尋找與藥效相關(guān)的成分，發(fā)現(xiàn)了多個(gè)具有一定價(jià)值的化學(xué)成分，本研究可為建立中藥指紋圖譜與藥效學(xué)相關(guān)的復(fù)方中藥質(zhì)量控制模式