1、目的：中藥馬兜鈴酸(aristolochic acid，AA)被發(fā)現(xiàn)有致突變、致腫瘤性，研究認(rèn)為其與馬兜鈴酸-DNA(aristolochic acid-DNA，AA-DNA)加合物有關(guān)。建立簡(jiǎn)便快速準(zhǔn)確檢測(cè)AA-DNA加合物的方法，對(duì)進(jìn)一步研究其生物化學(xué)特性和生物學(xué)行為有重要意義。 本文擬體外合成并分別采用高效液相色譜．電噴霧線形離子阱串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-ESI/MS/MS)技術(shù)與傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜(FT-ICRMS)鑒定

2、AA-DNA加合物，分析研究其質(zhì)譜行為，探討該類化合物結(jié)構(gòu)特征與質(zhì)譜裂解行為之間的相關(guān)性，歸納與總結(jié)這類化合物的質(zhì)譜裂解特征，最終建立簡(jiǎn)便快速準(zhǔn)確檢測(cè)AA-DNA加合物的質(zhì)譜檢測(cè)方法。 方法：AA經(jīng)酶活化法或化學(xué)活化法活化后分別與脫氧腺苷酸或脫氧鳥苷酸反應(yīng)生成AA-DNA加合物，優(yōu)化并最終確立了合成反應(yīng)條件。應(yīng)用液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(LC/MS/MS)技術(shù)對(duì)合成的AA-DNA加合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，優(yōu)化質(zhì)譜檢測(cè)模式及參數(shù)，詳細(xì)分析加合

3、物的質(zhì)譜行為，在此基礎(chǔ)上采用混合物直接進(jìn)樣的電噴霧-多級(jí)質(zhì)譜(ESI-MS<'n>)與LC-MS<'n>等方法，進(jìn)一步研究AA-DNA加合物在負(fù)離子模式的電噴霧電離條件下的質(zhì)譜裂解特征。應(yīng)用FT-ICRMS精確質(zhì)量數(shù)測(cè)定和同位素模式檢測(cè)進(jìn)一步對(duì)合成的AA-DNA加合物進(jìn)行鑒定。在此基礎(chǔ)上建立質(zhì)譜法檢測(cè)AA-DNA加合物的方法。 結(jié)果：采用酶活化法或化學(xué)活化法分別成功合成脫氧腺苷-AAⅠ、脫氧腺苷-AAⅡ、脫氧鳥苷-AAⅠ和脫氧鳥

4、苷-AAⅡ加合物，電噴霧線形離子阱質(zhì)譜負(fù)離子采集模式下信號(hào)響應(yīng)較好，測(cè)得其準(zhǔn)分子離子峰分別為m/z621、m/z 591、m/z 637與m/z 607。ESI-MS/MS譜圖提供了豐富的結(jié)構(gòu)信息，且四種加合物L(fēng)C/MS<'n>多級(jí)質(zhì)譜裂解方式相似。FT-ICRMS負(fù)離子采集模式下分別獲得加合物的精確質(zhì)量數(shù)，提供的分子式與加合物分子式相符。同位素模式顯示加合物同位素峰簇與相對(duì)豐度實(shí)測(cè)值分別與理論值相符。 結(jié)論：AA能在體外分別與