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文檔簡介
1、目的:探討靈杞黃斑顆粒含藥血清對兔RPE細胞氧化損傷的保護作用及機制。 方法:運用血清藥理學方法制備靈杞黃斑顆粒含藥血清,以H2O2(500 μmol/L)誘導建立體外RPE細胞氧化應激模型,分為正常對照(NC)組、模型(M)組、模型+空白血清(MS)組、模型+低劑量藥物血清(ML)組和模型+高劑量藥物血清(MH)組,分別采用MTT、TUNEL和流式細胞方法對各組RPE細胞的凋亡進行檢測。進一步通過測定SOD等抗氧化酶的活性以及
2、MDA等不飽和醛類的水平,來反映RPE細胞的抗氧化能力與氧化損傷程度,并用 western blot,免疫組化等方法檢測Caspase-3及Bcl-XL等凋亡相關蛋白表達的變化。相關統(tǒng)計分析采用SAS6.12統(tǒng)計軟件。 結果:MTT結果顯示含藥血清可以促進細胞增殖,減少H2O2對細胞生長的抑制。流式細胞儀檢測:NC、M、MS、ML、MH組各組凋亡率分別為4.85%±0.46%、20.02%±1.37%、21.84%±1.53%、
3、13.56%±0.87%、8.58%±0.74%,ML和MH組的凋亡率比M組明顯減少。TUNEL檢測結果:NC組中未見明顯凋亡細胞,M組中可見大量胞核黃色著染的凋亡細胞,ML組中散見胞核黃色著染的凋亡細胞,數(shù)量明顯少于M組,MH組凋亡細胞進一步減少。MDA含量及SOD活性測定:與NC組比較,M組RPE細胞MDA含量明顯增高,SOD活性明顯下降;ML組MDA水平增高幅度較M組減小,MH組更加減小,ML組和MH組SOD水平與M組相比均明顯升
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