植酸酶基因的克隆及轉(zhuǎn)化玉米的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 本文對植酸酶基因的克隆及轉(zhuǎn)化玉米進行研究,通過比較愈傷組織誘導(dǎo)和分化培養(yǎng)的結(jié)果,選用誘導(dǎo)結(jié)果較好,分化率相對較高的玉米基因型作為受體材料。通過大量試驗得到本研究中影響農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米的最佳因素。構(gòu)建了植酸酶基因植物表達載體pCAMBIA1301-phyA和pBI121-phyA。優(yōu)化了影響農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米的條件。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化玉米愈傷組織,將植酸酶基因轉(zhuǎn)到玉米愈傷組織中,通過篩選及抗性培養(yǎng),獲得了抗性玉米愈傷組織及抗性玉米苗。研究

2、工作獲得以下結(jié)果: 1.首次利用PCR從米曲霉中克隆植酸酶基因并測序。 2.首次將植酸酶基因在GeneBank注冊,注冊號為GI:47176935。 3.首次構(gòu)建了來自米曲霉植酸酶基因的畢赤酵母(Pichia pastoris)表達載體PIC9K-phyA和植物表達載體pCAMBIA1301和pBI121-phyA。 4.首次將來自米曲霉植酸酶基因在畢赤酵母中表達,篩選到多拷貝的畢赤酵母轉(zhuǎn)化子,并測定植酸

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