1、北京大學學位論文原創(chuàng)性聲明和使用授權說明原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內容外，本論文不含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品或成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律結果由本人承擔。論文作者簽名：7萬躉豇～日期：腳△年以月／日學位論文使用授權說明(必須裝訂在提交學校圖書館的印刷本)本人完全了解北京大學關于收集

2、、保存、使用學位論文的規(guī)定，即：按照學校要求提交學位論文的印刷本和電子版本；學校有權保存學位論文的印刷本和電子版，并提供目錄檢索與閱覽服務，在校園網(wǎng)上提供服務；學校可以采用影印、縮印、數(shù)字化或其它復制手段保存論文；因某種特殊原因需要延遲發(fā)布學位論文電子版，授權學校口一年／口兩年／口三年以后，在校園網(wǎng)上全文發(fā)布。(保密論文在解密后遵守此規(guī)定)者警碑聊妣及日期：乃／三年／Z月么日’Ⅲ㈣㈣0㈣Ⅷ舢1㈣10Y2499530人類的AMPK的KD和

3、AlD結構域及自噬相關因子ATG5的表達純化和核磁共振研究摘要：本課題以兩個細胞代謝通路中有重要作用的人源蛋白hATG5和I認MPKa2為研究對象，擬在通過目的蛋白的片段選取、表達純化和初步的NMR研究，為兩個目的蛋白的溶液結構研究提供了基本材料和數(shù)據(jù)。AMPK(AMPd印endentⅪnase)是真核生物普遍存在且序列保守的細胞能量感受器和調節(jié)器，是細胞中主要產能和耗能的代謝通路的調節(jié)樞紐。它能敏感地監(jiān)測細胞內AMP／ATP比率，根據(jù)

4、細胞對能量的需求和能量的儲備狀態(tài)，調控包括糖代謝，脂代謝和蛋白制合成等幾大代謝通路。高等真核生物的AMPK分為、B、Y三個亞基，其中亞基是AMPK被激活和發(fā)揮激酶功能直接相關的亞基，該亞基上的催化結構域(鼬naSeDomain，KD)能夠被上游的激酶磷酸化從而發(fā)揮AMPK的激酶功能，然而在沒有激活外因時，KD會被同一亞基上的自抑制結構域(Auto—i11llibitingDomain，AID)抑制。人源—蝴PK(MPK)作為包括糖尿病藥

5、、減肥藥物的靶標一直倍受關注。這些藥物都是通過使AMPK激活來發(fā)揮功能，但都是問接的方式。因此，揭示人源AMPK亞基的自抑制結構域(AID)對催化結構域(KD)的抑制機理，是設計針對AMPK的新藥的關鍵一步。本課題以主要分布于人的肝臟、肌肉和心臟的AMPKQ2亞型(hAMPK_q2)的KD和AID結構域為研究對象，通過設計KD和AID片段的原核蛋白表達系統(tǒng)，表達純化出KD和AID的目的蛋白。使用提取出的目的蛋白，進行了NMR一維1H譜和