D28k鈣結合蛋白基因真核表達質粒的構建及其表達效果的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究擬利用分子生物學技術構建雞CaBP-D28k的真核表達質粒,在雞體內進行表達并以此來對禽體內鈣的營養(yǎng)調控機制進行研究,并進一步尋找利用基因注射來解決生產中由于鈣的營養(yǎng)不足而引起的各種缺乏病的可行性.該研究是對CaBP-D28k作用的初步探討,旨在為CaBP-D28k的進一步研究、開發(fā)奠定基礎,通過RT-PCR的方法從蛋雞小腸組織RNA擴增出789bp完整的雞CaBP-D28kcDNA.通過TA克隆,我們將所擴增的cDNA克隆入載體

2、pGEM-T內,經酶切和PCR初步鑒定后,再測定分析其序列的正確性.為了驗證克隆的雞CaBP-D28k cDNA的編碼情況,該研究通過將雞CaBP-D28k cDNA亞克隆入真核表達載體pCEP4內,構建了真核表達構件pCEP4-CaBP-D28k,用所獲得的真核表達構件pCEP4-CaBP-D28k轉染COS-1細胞,進行暫態(tài)表達,用免疫熒光法檢測到表達產物.用真核表達構件pCEP4-CaBP-D28k注射老年蛋雞,經血液中降鈣素、甲

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