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![基因槍法介導(dǎo)Pina和Pinb基因轉(zhuǎn)化硬粒小麥的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/f3ab3d66-f092-48ef-86bc-762c8fd28a98/f3ab3d66-f092-48ef-86bc-762c8fd28a981.gif)
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1、本論文以4種硬粒小麥品種Luna、Ofanto、Venusia和Latino×Lira為試驗(yàn)受體材料,應(yīng)用基因槍轉(zhuǎn)化法,將野生型Pina和Pinb基因轉(zhuǎn)入不含有這兩個(gè)基因的硬粒小麥中,取得如下結(jié)果。1)挽救陳年小麥種質(zhì)資源方法的建立。以2種普通小麥(Triticum aestivum L.)品種湘83-2661、襄麥5號(hào)和4種硬粒小麥品種Luna、Ofanto、Venusia和Latino×Lira離體成熟胚為外植體材料,應(yīng)用MS基本
2、培養(yǎng)基附加2,4-D、NAA 、KT、6-BA、GA3進(jìn)行培養(yǎng),試驗(yàn)采用單因子和正交設(shè)計(jì)的方法。結(jié)果表明,GA3對(duì)離體成熟胚的萌發(fā)有顯著促進(jìn)作用。2)大腸桿菌的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化和質(zhì)粒大量抽提及純化方法的優(yōu)化。采用優(yōu)化后的方案,分別將質(zhì)粒pCaI-Neo、pUbiPina和pUbiPinb轉(zhuǎn)化到大腸桿菌菌株XL1-Blue中,對(duì)3種質(zhì)粒進(jìn)行大量制備及純化的結(jié)果表明,制備的質(zhì)粒為目的質(zhì)粒且純度和產(chǎn)量均較高。3)以GUS瞬時(shí)表達(dá)研究并優(yōu)化了基因槍
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