1、I摘要土壤鹽漬化嚴重影響世界農業(yè)發(fā)展，成為危及人類生存的重大資源環(huán)境問題。為尋求開發(fā)鹽漬地資源、提高農業(yè)產量，一般采用生化分子技術方法從耐鹽植物中克隆耐鹽基因并在其他高產的非耐鹽植物中表達，使非耐鹽植物能在鹽脅迫環(huán)境下高產。親環(huán)素(Cyclophilins，CyPs)是一類廣泛存在于各生命體的多基因家族，一般分布在細胞質與各種細胞器中，具有肽脯氨酰順反異構酶(PPIase)活性，能夠誘導脯氨酸肽鍵的順反異構化，使蛋白質正確折疊。研究表明

2、，植物體內親環(huán)素的酶活性與植物的抗逆性密切相關，過量表達的親環(huán)素基因能夠明顯的提高植物對高鹽脅迫的抵抗力。鹽地堿蓬(Suaedasalsa)是一種典型的鹽堿地指示植物。本論文以鹽地堿蓬為材料，克隆一個親環(huán)素基因SsCYP1，通過序列分析并在大腸桿菌中成功表達，最后在不同的鹽濃度的LB培養(yǎng)基中進行耐鹽性分析。研究結果如下：1、鹽地堿蓬親環(huán)素基因SsCYP1的克隆以及蛋白結構預測分析通過簡并引物擴增和RACE技術，克隆出堿蓬基因全長，大小為

3、875bp，編碼區(qū)為531bp，編碼176個氨基酸，分子量約為18.8KDa，等電點為7.67，富含Gly和Lys，其W、V)，39個親水性氨基酸(N、C、Q、S、T、Y)。該基因編碼的蛋白與金絲小棗（Ziziphusjujuba），薺菜（Capsellarubella）等氨基酸序列同源性達到88%，二級結構由α螺旋（19.89%）、隨機卷曲（40.34%）、延伸鏈（28.41%）和少量的β轉角（11.36%）構成；信號肽分析顯示SsC

4、YP基因所編碼的蛋白無信號肽；跨膜結構分析顯示該蛋白不具備跨膜結構；疏水性分析顯示該蛋白兩端是親水性的；螺旋卷曲分析顯示該蛋白形成卷曲的可能性很低；磷酸化位點分析顯示該蛋白有7個磷酸化位點。2、SsCYP1基因異源性表達根據獲得的全長序列在編碼區(qū)兩端設計引物，并在引物兩端引入BamHI和NotI雙酶切位點。構建原核表達載體pETdute1SsCYP1后轉入大腸桿菌Transetta（DE3）中誘導表達。通過SDSPAGE檢測發(fā)現目的蛋白