共轉(zhuǎn)化方法獲得無標(biāo)記高賴氨酸轉(zhuǎn)基因玉米.pdf_第1頁(yè)
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1、該實(shí)驗(yàn)對(duì)具有優(yōu)良農(nóng)藝性狀和較高配合力的6個(gè)玉米自交系X90、X178、X08、HC、X333、X04及雜交組合X04/X06、X08/X178、X178/X90、X08/X333、X333/X08、HC/X178進(jìn)行了組織培養(yǎng)篩選,在N<,6>培養(yǎng)基上,其中X08、X178兩個(gè)自交系和X08/X178、X178/X90兩個(gè)雜交組合的幼胚能誘導(dǎo)出胚性愈傷組織,可用于玉米的遺傳轉(zhuǎn)化.將高賴氨酸蛋白基因SBLR置于玉米胚乳特異性表達(dá)啟動(dòng)子19

2、Z下游,構(gòu)建了植物表達(dá)載體p19SB用于玉米的基因槍轉(zhuǎn)化.制備基因槍微彈時(shí)將兩個(gè)植物表達(dá)載體p19SB和pHyg(含有潮霉素選擇標(biāo)記基因,hpt)以2:1比例混合,共轉(zhuǎn)化來源于玉米自交系X08和X178,雜交組合X08/X178、X178/X90的胚性愈傷組織,共轉(zhuǎn)化97皿,5061塊愈傷組織.經(jīng)潮霉素篩選得到207株再生玉米植株.PCR檢測(cè)表明69株含有潮霉素選擇標(biāo)記基因,其中11株含有高賴氨酸蛋白基因SBLR,共轉(zhuǎn)化頻率5.3﹪,通

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