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1、上海交通大學(xué)博士后學(xué)位論文高表達(dá)靈芝3羥甲基戊二酰輔酶A還原酶基因提高靈芝酸的生產(chǎn)姓名:徐軍偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士后專業(yè):生物學(xué)指導(dǎo)教師:鐘建江201109的表達(dá)量是野生型的23倍。我們進(jìn)一步動(dòng)態(tài)分析了野生型(WT),轉(zhuǎn)化對(duì)照(TR)和tHMGR高表達(dá)(HMGR)的菌株中靈芝酸的積累,中間代謝產(chǎn)物(鯊烯和羊毛甾醇)的動(dòng)態(tài)變化以及四個(gè)關(guān)鍵酶HMGR,焦磷酸法呢酯合成酶(FPS),鯊烯合成酶(SQS)和羊毛甾醇合成酶皿s)基因的表達(dá)情況。工程
2、菌株中靈芝酸的含量比野生型菌株提高了2倍,中間代謝物鯊烯和羊毛甾醇的積累也高于相應(yīng)的野生型菌株,關(guān)鍵基因hmgt;frosqs和豇的最高轉(zhuǎn)錄水平分別是野生型10,68,68和91倍,表明高表達(dá)tHMGR基因增強(qiáng)了靈芝細(xì)胞合成靈芝酸的能力。本研究闡述了在高等真菌靈芝中采用基因工程的手段提高靈芝酸積累的方法,為三萜類次級(jí)代謝產(chǎn)物靈芝酸的高效生產(chǎn)和調(diào)控提供了有用的信息。關(guān)鍵字:靈芝酸,靈芝,琥珀酸脫氫酶鐵硫蛋白亞基,同源基因轉(zhuǎn)化,基因工程,3
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