1、四川農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文大熊貓（Ailuropoda melanoleuca）精子異卵胞質(zhì)內(nèi)顯微受精初步研究姓名：劉玉良申請學位級別：碩士專業(yè)：動物遺傳育種與繁殖指導教師：鄭鴻培;侯蓉200306011 ．前言常規(guī)評定精液品質(zhì)的各種指標，如精子活力、精子密度等不能預測家畜以及野生動物的實際生殖能力。7 0 年代初，Y a n a g i m a c h i 等人建立起了一項評定精子受精能力的新技術——精子穿透倉鼠卵試驗( S p e r

2、 m P c n e t l - a f i o nA s s a y ，簡稱S P A ) 。它根據(jù)去透明帶的倉鼠卵無種屬特異性的原理，通過精子穿入倉鼠卵的百分率來評價精子的受精能力。但對于形態(tài)異常精子，無法用精子穿透倉鼠卵試驗來進行受精能力的評定。卵胞質(zhì)內(nèi)顯微受精技術( I c s I ) 是一項輔助體外受精技術。它是借助顯微操作儀將精子注入卵母細胞質(zhì)內(nèi)，從而完成受精過程。它降低了對精子品質(zhì)各種指標的要求，使各種在體內(nèi)外不可能發(fā)生正

3、常受精的精子與卵子受精。因此，形態(tài)不正常的精子，可以通過卵胞質(zhì)內(nèi)顯微受精技術，將精子頭部注入同種或異種卵胞質(zhì)，觀察原核形成以判定受精能力，或在原核融合、卵裂后，進行染色體核型檢查以確定染色體是否正常。大熊貓“i l u r o p o d a m e l a n o l e u c a ) 是我國一級保護動物，也是我國特有的世界珍貴動物，被認為是哺乳類多樣性的重要組成部分，同時大熊貓又具有很高的觀賞和科研價值。由于大熊貓繁殖力低、棲息環(huán)

4、境不斷縮小和割裂、遺傳交流中斷、人為干擾等原因，野外大熊貓的數(shù)量急劇減少，已瀕臨滅絕境地。為了進行大熊貓的保護，國內(nèi)外許多學者先后進行了多方面的研究，但利用精子胞質(zhì)內(nèi)顯微受精技術對其精子受精能力進行評價，目前尚未見報道。因此，利用現(xiàn)代胚胎生物技術，對大熊貓精子受精能力做出科學評價，不僅為大熊貓精子( 包括結構、形態(tài)缺陷及損傷精子) 作為遺傳資源進行保存提供了理論依據(jù)，還為以后開展大熊貓卵子胞質(zhì)內(nèi)顯微受精奠定基礎。同時也為其他野生瀕危動物

5、的繁育和保護提供參考。1 ．1 卵胞質(zhì)內(nèi)顯微受精研究卵胞質(zhì)內(nèi)顯微受精技術( i n t r a c y t o p l a s m i cs p e r m 硒e ：c t i o n 簡稱I C S I ) 是2 0 世紀8 0年代后期發(fā)展起來的一項新型的輔助體夕} 受精技術，它是借助顯微操作儀，將一個精子或生精細胞直接注入卵母細胞質(zhì)內(nèi)，從而完成受精的過程。由于該技術可排除透明帶和卵質(zhì)膜對糟子入卵的阻礙作用，故對耪子的死活及其完整性無