綿羊玻璃化冷凍胚胎直接移植試驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、該研究應(yīng)用EFS40玻璃化液對(duì)6.5~7日齡的綿羊胚胎進(jìn)行玻璃化冷凍及解凍后直接移植試驗(yàn).所用胚胎都是經(jīng)FSH超排處理綿羊獲得的.胚胎經(jīng)形態(tài)鑒定后,用胚胎存放液(含20﹪FCS的PBS液)清洗.冷凍前,胚胎在室溫(18~25℃)下置于含10﹪乙二醇的PBS液中平衡10分鐘,移入玻璃化液EFS40中裝管并平衡30秒鐘,液氮?dú)庵醒?分鐘后投入液氮中保存,解凍時(shí)在室溫(18~25℃)空氣浴10秒鐘后,32℃水浴20秒鐘解凍.試驗(yàn)1:胚胎解凍

2、后以0.5M蔗糖液一步(6分鐘)除去保護(hù)劑或用胚胎存放液一步直接除去保護(hù)劑,然后胚胎移入胚胎存放液中洗3次,將形態(tài)正常的胚胎手術(shù)移植至同期發(fā)情的受體綿羊子宮內(nèi);試驗(yàn)2:玻璃化冷凍胚胎解凍后在0.25ml聚乙烯塑料細(xì)管內(nèi)脫除防凍劑直接裝管移植,以常規(guī)冷凍解凍為對(duì)照組.該研究結(jié)果表明:綿羊胚胎應(yīng)用EFS40進(jìn)行玻璃化冷凍,解凍后用胚胎存放液細(xì)管內(nèi)脫除防凍劑后直接移植獲得較高的妊娠率和胚胎存活率.該方法與常規(guī)方法比較簡(jiǎn)便、省時(shí)、可普及,特別是

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