淹水脅迫下玉米幼苗的轉錄組分析及耐漬候選基因克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、漬害是在玉米生長發(fā)育過程中常見的非生物逆境脅迫因子之一,也是熱帶和亞熱帶地區(qū)玉米生產(chǎn)面臨的主要問題。玉米苗期耐漬性的遺傳剖析對于選育耐漬玉米新品種具有重要意義?,F(xiàn)有研究表明,玉米苗期耐漬性可能是由多基因控制的復雜數(shù)量性狀。本實驗室前期通過關聯(lián)分析和連鎖分析的方法都在玉米第5染色體5.04bin上檢測到一個控制玉米耐漬性的主效QTL。
  本研究旨在以耐漬性差異明顯的2個玉米姊妹系A3237(耐漬)和A3239(敏感)為材料,結合簡

2、化基因組測序、QTL定位、RNA-seq技術和生物信息學等方法,篩選和克隆重要的耐漬候選基因及啟動子序列,分析基因結構及其在不同耐漬性材料、不同淹水時期(0h,2h,4h,8h和12h)和不同組織部位的表達模式。本研究的主要結論如下:
  1、按照表達差異倍數(shù)大于2倍和P值小于0.05為閾值進行表達差異判斷,在淹水脅迫的A3237和A3239幼苗中,共篩選到差異表達基因608個,這些差異表達的基因主要涉及生物合成代謝活性、氧化還原

3、酶活性、逆境響應等,且大多數(shù)基因在耐漬自交系A3237中都表現(xiàn)為高表達。
  2、基因表達結合QTL定位和生物信息學分析,在5.04bin找到25個耐漬候選基因,其中GM2和GM17的編碼區(qū)在A3237和A3239中存在差異,A3239中這2個基因轉錄本序列與B73參考基因序列一致,但A3237中GM2序列與A3239存在一個堿基突變,使得丙氨酸變成蘇氨酸,A3237中GM17序列相對A3239存在一個缺失66bp的轉錄本。

4、>  3、GM2和GM17分別編碼一個AP2-結構域的蛋白質和一個HLH結構域的蛋白質。實時熒光定量PCR分析表明,GM2和GM17基因受漬水脅迫誘導表達,其中GM2的表達量在A3237和A3239間存在顯著差異,而GM17的表達量在A3237和A3239間差異不顯著。
  4、GM2和GM17基因啟動子區(qū)含有厭氧響應相關的順式作用元件,如ARE、G-box和GC-motif。在A3237和A3239中,GM2基因上游的啟動子區(qū)存

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