龍眼SVP基因的克隆及功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本試驗以‘四季蜜’、‘立冬本’龍眼嫁接新梢及‘紅核子’龍眼葉芽為材料,研究不同龍眼品種中SVP同源基因序列的差異(包括基因序列的可變剪切)及表達差異,探究龍眼SVP同源基因在龍眼的成花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中(包括花芽分化和幼年期調(diào)控)的作用。本試驗主要獲得了以下研究結(jié)果:
  1.熒光定量PCR驗證龍眼13個成花調(diào)控基因在‘四季蜜’和‘立冬本’嫁接新梢中表達的差異。結(jié)果表明,GI與FKF1基因在‘四季蜜’中均表達升高,SVP、FLC、EMF2

2、的同源基因在‘四季蜜’中表達降低。龍眼中的TFL1同源基因TFL1(6027)與TFL1(6475)變化趨勢不同,TFL1(6027)在‘四季蜜’中的表達稍高于‘立冬本’,而TFL1(6475)在‘四季蜜’中表達降低。LFY、 AP1與SOC1基因在兩個品種中的表達差異不明顯。
  2.以‘四季蜜’龍眼嫁接新梢及‘紅核子’龍眼葉芽為試驗材料,克隆龍眼中的SVP同源基因,得到‘四季蜜’龍眼中SVP645基因的7個不同拷貝序列、SVP

3、2719的7個可變剪切序列,‘紅核子’龍眼中SVP645基因的7個不同拷貝序列、SVP2719的4個可變剪切序列。分析各序列,發(fā)現(xiàn)龍眼 SVP645基因的大多數(shù)拷貝在‘紅核子’和‘四季蜜’中序列存在差異;SVP2719基因在‘四季蜜’和‘紅核子’中的堿基序列基本無差異,編碼區(qū)氨基酸序列完全一致。
  3.熒光定量PCR分析兩個龍眼SVP同源基因在‘紅核子’品種中花芽分化過程的表達。結(jié)果顯示,在1月份龍眼花芽開始形態(tài)分化的時候,SV

4、P645基因的表達達到頂峰,而SVP2719基因表達卻開始下降,表明 SVP645與 SVP2719基因可能具有不同的功能,SVP2719功能可能與抑制花芽分化有關(guān)。
  4.選擇‘四季蜜’中SVP2719的S-1和S-6號基因序列構(gòu)建重組表達載體,根癌農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化本氏煙草。結(jié)果發(fā)現(xiàn)龍眼 SVP2719-S1基因使煙草的花蕾形狀發(fā)生了變化,花蕾畸形,不能正常成花;SVP2719-S6基因使煙草的花朵形狀發(fā)生了變化,花瓣畸形,但花

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