福建柑桔種質(zhì)的RAPD分析及龍眼LEAFY基因克隆和表達(dá)的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本論文中“福建柑桔種質(zhì)的RAPD分析”部分,對(duì)柑桔基因組DNA的提取方法作出探索。在參考有關(guān)RAPD分析的反應(yīng)體系和程序的基礎(chǔ)上,對(duì)影響PCR擴(kuò)增的重要參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化,經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn),確立了適合柑桔大量樣品PCR反應(yīng)的優(yōu)化體系和反應(yīng)程序。篩選出擴(kuò)增多態(tài)性較高的引物21條,對(duì)從福建各地所采集的54份柑桔材料(包括雜柑種質(zhì))進(jìn)行RAPD鑒定分析,并探討了它們之間的差異和親緣關(guān)系;此外,對(duì)聚類(lèi)結(jié)果中幾個(gè)品種間的差異和親緣關(guān)系進(jìn)行了再次聚類(lèi)分析,以

2、驗(yàn)證第一次的聚類(lèi)結(jié)果。結(jié)果表明,在遺傳距離D值=0.45水平上,54份柑桔材料基本上可以聚為三大類(lèi),與常規(guī)的柑桔屬分類(lèi)相同,即金柑屬、枳屬、柑桔屬,表現(xiàn)出較遠(yuǎn)的親緣關(guān)系;在遺傳距離D值=0.39水平上,柑桔屬種質(zhì)又可分成三類(lèi)。這充分表明了福建柑桔種質(zhì)的遺傳背景復(fù)雜,種質(zhì)資源遺傳差異大;同時(shí)也說(shuō)明了使用RAPD技術(shù)對(duì)柑桔種質(zhì)資源遺傳多樣性及其之間的親緣關(guān)系鑒定的可行性和可靠性。 本論文中“龍眼LEAFY基因克隆和表達(dá)的研究”部分,

3、對(duì)龍眼總RNA和基因組DNA的提取方法進(jìn)行了優(yōu)化;根據(jù)柑桔、葡萄、梨、蘋(píng)果和芒果等果樹(shù)上已克隆得到的LFY同源基因的保守區(qū)序列,設(shè)計(jì)合成兼并引物,在龍眼果樹(shù)上克隆得到了長(zhǎng)度分別為425bp和1816bp龍眼中的LFYcDNA和DNA片段,且都已經(jīng)在GenBank中登錄,其登記號(hào)分別是DQ247694和DQ307391;利用定量RT-PCR方法,將兼并引物重新合成特異引物,對(duì)此基因在龍眼不同器官組織中的表達(dá)情況進(jìn)行了研究分析,實(shí)驗(yàn)得知LF

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