基于SSR標記技術(shù)的越橘親緣關(guān)系分析及品種鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文建立了適用于越橘(Vaccinium spp.)品種鑒定及親緣關(guān)系分析的SSR-PCR技術(shù)體系,用SSR標記技術(shù)對22種越橘栽培品種進行了遺傳差異及親緣關(guān)系分析,建立了一套完善的越橘品種鑒定體系,為越橘種質(zhì)資源的評價、鑒定、管理及越橘新品種的培育奠定了基礎(chǔ)。
  建立的SSR-PCR反應(yīng)程序為:94℃預(yù)變性4min;94℃40s,55~64℃(根據(jù)引物而定)40s,72℃40s,35個循環(huán);72℃延伸8min。優(yōu)化的SSR-P

2、CR反應(yīng)體系為:20μL體系,Taq酶1.5U,Mg2+2.0nmol/μL,dNTP0.25nmol/μL,上下游引物各0.25pmol/μL,DNA模板40ng。
  篩選出15對擴增條帶清晰、多態(tài)性高、重復(fù)性好的引物。每對引物獲得多態(tài)性條帶3~13條,22個品種共獲得115條帶,其中113條為多態(tài)性條帶,多態(tài)性比率為98.26%。22個品種的遺傳相似性系數(shù)居于0.486~0.886之間,其中奴伊(Nui)和布魯瑞卡(Blue

3、reka)遺傳相似性系數(shù)最大;澤西(Jersey)和美登(Blomidon)遺傳相似性系數(shù)最小。使用NTSYSpc(2.10e)根據(jù)非加權(quán)組平均法(UPGMA)繪制了22個越橘品種的遺傳關(guān)系聚類圖。聚類結(jié)果顯示,供試越橘品種被分為2個大類,美登(Blomidon)被單獨聚為一類,其余的21個品種被聚為一類,此21個品種又聚為2個亞類,其中晚熟品種迪克西(Dixi)和埃利奧特(Elliot)聚在一起,另外19個中早熟品種聚在一起。說明SS

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