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![枇杷己糖激酶調(diào)控糖積累的分子機制研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/adea408f-735d-4d2a-8951-553e0f604bed/adea408f-735d-4d2a-8951-553e0f604bed1.gif)
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文檔簡介
1、枇杷原產(chǎn)我國,栽培歷史悠久。枇杷果實,形如黃杏、味道甘美、柔軟多汁、風味甘甜、肉質(zhì)細膩。枇杷富含人體所需的各種營養(yǎng)元素,是營養(yǎng)的保健水果。但目前我國多數(shù)枇杷品種果實糖含量偏低,風味較淡,對枇杷品質(zhì)造成了較大的影響。糖含量是果實品質(zhì)的重要指標之一,糖還有酸、類胡蘿卜素和其它營養(yǎng)成分及芳香物質(zhì)合成的基礎原料,糖含量直接影響果實食用價值及商品價值。因此,研究枇杷果實糖積累生理及分子機制,可以闡明果實糖調(diào)控機制,為提高枇杷果實品質(zhì)提供理論依據(jù)。
2、本研究以浙江農(nóng)林大學植物園成年枇杷樹(Eriobotryaj aponica(Thunb.) indl.)為試材,克隆了己糖激酶基因,研究該基因在枇杷果實發(fā)育過程中表達模式,研究了枇杷果實發(fā)育過程中己糖激酶活性與果實糖含量的變化關系,研究結果如下:
利用RACE技術分離獲得了己糖激酶基因cDNA全長序列;克隆測序顯示己糖激酶基因全長1839bp;5'-UTR長度59bp;3'-UTR長度291bp; ORF長度為1491b
3、p;一共編碼497個氨基酸。枇杷cDNA全長序列與其他植物如橙、葡萄的同源性為72%-81%。通過Real-TimeRT-PCR分析枇杷幼葉、成熟葉、莖和花及枇杷果實不同發(fā)育時期果實中己糖激酶基因的表達量。己糖激酶基因在枇杷花組織中具有較高的表達量;而在果實發(fā)育過程中,在花后30天的表達量較低,隨后迅速增高,在花后75天達到最大值,而后慢慢減低,直到果實成熟。
以CaMV35S作為GFP蛋白的啟動予,將ORFEjHXK1連
4、接到表達載體pCAMBIA-1302雙元載體的GFP編碼區(qū)的上游側,使用基因槍,將重組質(zhì)粒轉化洋蔥表皮細胞,然后共焦顯微鏡下觀察到的GFP信號,共焦成像的GFP熒光顯示,35S:EjHXK1的-GFP融合蛋白主要在細胞膜上。通過HPLC法,對枇杷果實發(fā)育進程中3種糖含量進行了測定。在整個發(fā)育過程前期枇杷果實的糖主要以蔗糖為主,隨著成熟度的增加蔗糖含量呈逐漸減少的趨勢,但變化較平穩(wěn)。果實成熟前期葡萄糖和果糖的含量較低,在花后的75天,隨著
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