1、干擾素(Inferons，IFN)是調(diào)節(jié)細胞生長、分化、免疫反應、抗腫瘤及抗病毒等多種重要生理功能的細胞因子，通過IFN誘導干擾素刺激基因編碼的蛋白家族(ISGs)組成的信號網(wǎng)絡完成其信號傳導過程。干擾素誘導的跨膜蛋白IFITM(inferon-inducible transmemberaneproteins)是系列ISGs中的一個家族，干擾素誘導后可大量表達。近幾年發(fā)現(xiàn)IFITM蛋白可抑制多種病毒的復制。
　　IFITM在人、畜

2、、禽、鼠等多種生物中都有表達，在進化上也非常保守，但不同物種中報道的IFITM基因種類和數(shù)量都有一定的差異。人類共有IFITM1、IFITM2、IFITM3和IFITM5基因的表達，其中IFITM1、IFITM2和IFITM3廣泛表達于多種組織中，而IFITM5僅在成骨細胞中發(fā)現(xiàn)。而鼠中除了有IFITM1、IFITM2、IFITM3、IFITM5外，還有IFITM6和IFITM7的存在。最近有文獻報道IFITM蛋白具有抗甲型流感病毒（I

3、nfluenzaA virus，IAV）等一些黃病毒屬病毒及艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus，HIV)等多種病毒的功能，引起了廣泛關注。本論文主要以豬IFITM基因的序列、結構、表達及其對乙腦病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）的影響進行了研究。
　　本論文主要研究結果有:
　　1、IFITM基因的克隆及其序列分析。通過序列對比已知的IFITM基因的CDS

4、區(qū)保守序列，設計特異性的引物，從豬腎細胞PK15中擴增出豬IFITM基因，提交序列至NCBI。
　　2、IFITM基因的進化分析。以豬組織的總DNA為模板，擴增出IFITM1、IFITM2、IFITM3等3個基因的全長序列，經(jīng)過分析和序列對比，三個基因都含有一個內(nèi)含子，并確定這三個基因均位于豬的2號染色體上。在豬基因組中尚未發(fā)現(xiàn)完整的IFITM5和IFITM10。通過繪制系統(tǒng)進化樹發(fā)現(xiàn)豬IFITM與牛(Bos taurus)IFI

5、TM基因的同源性最高達到77％以上，牛和鼠的IFITM5同源率高達90％以上。
　　3、IFITM基因的組織表達分析。采集了豬的不同組織提取RNA，分別擴增IFITM1、IFITM2、IFITM3的基因序列，發(fā)現(xiàn)IFITM1、IFITM2和IFITM3在各組織中的表達有較大差異。IFITM1和IFITM3在一些組織（如肝和腎）中表達量較大，而IFITM2僅在豬脾臟組織中檢測出有表達。
　　4、抗JEV功能的初步分析。將豬的I

6、FITM1、IFITM2和IFITM3分別連接到真核表達載體pcDNA3.1(+)上，分別構建了三個重組質(zhì)粒pcDNA3.1(+)-IFITM1、pcDNA3.1(+)-IFITM2和pcDNA3.1(+)-IFITM3，瞬時轉(zhuǎn)染至PK15細胞，然后進行JEV感染實驗，細胞病變分析及RT-PCR結果分析表明三組IFITM基因?qū)EV具有不同程度的抑制作用。
　　5、穩(wěn)定表達IFITM細胞系的構建。將構建好的三個重組質(zhì)粒pcDNA3