1、<p>　　啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊

2、啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊第六章 主要組織相容性復(fù)合物主要組織相容性復(fù)合物(major histocompatibility complex...主要組織相容性抗原是指出MHC編碼的一類(lèi)膜蛋白分子,在蛋白質(zhì)抗原信號(hào)傳遞中起重要...啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊

3、啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊</p><p>　　第六章 主要組織相容性復(fù)合物</p><p>　　主要組織相容性復(fù)合物(major histocompatibility complex，MHC)是表達(dá)于脊推動(dòng)物有核細(xì)胞表面的一類(lèi)具有高度多態(tài)性、含有多個(gè)基因座位，并緊密連鎖的

4、基因群。這些基因表達(dá)的蛋白就是主要組織相容性抗原。MHC最初是從小鼠中發(fā)現(xiàn)的，1948年George snell等在用經(jīng)典遺傳學(xué)方法分析腫瘤和其他組織移植引起的排斥現(xiàn)象時(shí)發(fā)現(xiàn)，機(jī)體識(shí)別某一移植物是自身的還是非自身的現(xiàn)象是有其遺傳基礎(chǔ)的。讓同一代小鼠自交，可以得到純系(inbred strain)，在大約20代以后，每一個(gè)個(gè)體的染色體的等位基因(allele)都相同，即純合子(homozygous)。每一自交品系只表達(dá)親代群體中的一類(lèi)等位

5、基因，不同的自交品系表達(dá)不同類(lèi)的等位基因，即不同自交系個(gè)體之間是同種異型(allotype)。George snell發(fā)現(xiàn)自身或同—自交系中的個(gè)體間進(jìn)行皮膚移植，不出現(xiàn)排斥(rejection)現(xiàn)象，稱(chēng)為自體移植(autograft)或同系移植(syngraft)。當(dāng)不同的自交系個(gè)體之間進(jìn)行皮膚移植，即同種異型移植(allograft)，則出現(xiàn)排斥現(xiàn)象。負(fù)責(zé)識(shí)別某一組織是同源的并予</p><p>　　MHC最初

6、是因免疫移植排斥現(xiàn)象而被發(fā)現(xiàn)，但是它對(duì)免疫應(yīng)答所起的重要作用是在研究小鼠和豚鼠對(duì)合成的多肽抗原免疫應(yīng)答強(qiáng)度影響時(shí)發(fā)現(xiàn)的。進(jìn)一步研究表明，MHC在抗原遞呈和免疫應(yīng)答調(diào)控方面具有極為重要的功能。由于群體中不同個(gè)體之間MHC存在高度多態(tài)性不同個(gè)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答強(qiáng)度和能力也存在一定的差異，因而在對(duì)疾病的易感性</p><p>　　(susceptibility)和抗性也有所不同。MHC被認(rèn)為是一組重要的免疫應(yīng)答基因(i

7、mmue responsegene)。由于MHC具有高度多態(tài)性特點(diǎn)．近年來(lái)的研究顯示MHC定型及多態(tài)性分析與器官移植配型及移植成功率合關(guān)。MHC又是法醫(yī)個(gè)體識(shí)別的重要標(biāo)志。MHC具有重要抗原遞呈功能，對(duì)抗原信號(hào)的傳遞具有—定的選擇性，由于不同人群的MHC多態(tài)性差異，也就構(gòu)成對(duì)不同疾病易感性和抗性的差異。本章著重介紹MHC的結(jié)構(gòu)與功能及其遺傳規(guī)律，以及在免疫應(yīng)答方面的重要作用。</p><p>　　第一節(jié) 主要組

8、織相容性抗原的結(jié)構(gòu)與功能</p><p>　　主要組織相容性抗原是指出MHC編碼的一類(lèi)膜蛋白分子，在蛋白質(zhì)抗原信號(hào)傳遞中起重要作用。MHC分子的功能研究對(duì)其空間結(jié)構(gòu)的闡明起到了提示和指導(dǎo)作用。Don wiley實(shí)驗(yàn)室通過(guò)對(duì)MHC分子以木瓜蛋白酶剪切得到了細(xì)胞外部分的晶體，并進(jìn)行了X射線晶體學(xué)結(jié)構(gòu)研究分析，使我們對(duì)MHC分子功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)有了較清楚的認(rèn)識(shí)。由于MHC分子結(jié)構(gòu)和功能的不同又分為MHC—Ⅰ類(lèi)分子(MHC

9、 class Ⅰ)和MHC—Ⅱ類(lèi)分子(MHC class Ⅱ)兩類(lèi)。MHC—Ⅰ類(lèi)分子表達(dá)于所有有核的細(xì)胞表面，而MHC—Ⅱ類(lèi)分子僅表達(dá)于部分細(xì)胞表面，如抗原遞呈細(xì)胞(antigen presenting celll，APC)、B細(xì)胞、活化的T細(xì)胞及部分內(nèi)皮細(xì)胞等。兩類(lèi)MHC分子結(jié)構(gòu)不同，其抗原遞呈功能也明顯不同，表現(xiàn)為抗原的選擇性和所遞呈的細(xì)胞的選擇性差異以及免疫應(yīng)答效應(yīng)的差異。本節(jié)將著重介紹MHC分子的結(jié)構(gòu)和功能。</p>

10、<p>　　一、第一類(lèi)主要組織相容性抗原（MHC—Ⅰ）分子</p><p>　　1．MHC—I類(lèi)分子的基本結(jié)構(gòu)</p><p>　　完整的MHC—I類(lèi)分子含有兩條多肽鏈：一條是α鏈，又稱(chēng)重鏈，人的HLA—Ⅰ類(lèi)分子的α鏈相對(duì)分子質(zhì)量約4.4×l04(小鼠約4.7× 104)，另一條稱(chēng)β鏈，又稱(chēng)β2微球蛋白(β2 Microglobulin，β2m)，相對(duì)分子

11、質(zhì)量約1.2×l04．是由非 MHC基因編碼。HLA—I類(lèi)分子α鏈有 一個(gè)N寡糖基連接位點(diǎn)，而小鼠有2個(gè)。α鏈有5個(gè)主要的結(jié)構(gòu)域(domain)，即α1(N端)、α2、α3、跨膜區(qū)及胞質(zhì)區(qū)(C端)，總長(zhǎng)約367個(gè)氨基酸殘基左右。其中α1、α2、α3各含約90個(gè)氨基酸殘基，跨膜區(qū)約25個(gè)殘基，胞質(zhì)區(qū)約30個(gè)殘基。在α3與跨膜區(qū)之間含有木瓜蛋白酶剪切位點(diǎn)。Don Wiley等使用木瓜蛋白酶剪切HLA—Ⅰ類(lèi)抗原A2分子得到細(xì)胞外部分

12、的分子結(jié)晶，并用于X射線衍射晶象分析得到MHC分子構(gòu)象圖(圖6—1)。α1、α2形成與抗原肽結(jié)合的區(qū)域，α2和α3分別形成63和約90個(gè)殘基的二硫鍵連接的環(huán)。由于α3和β2m與免疫球蛋白恒定區(qū)氨基酸順序同源，所以共同構(gòu)成Ig樣區(qū)(immunoglobulin like domain)(圖6—2)。與該區(qū)域以非共價(jià)鍵（次級(jí)鍵）相聯(lián)系的β2微球蛋</p><p>　　2．MHC—I類(lèi)分子的空間結(jié)構(gòu)與功能</p&

13、gt;<p>　　α1和α2區(qū)共同形成了一個(gè)寡肽抗原結(jié)合槽。結(jié)合槽的底部由8條反向平行的β片層(β—pleated sheet)結(jié)構(gòu)支撐著兩條平行的α螺旋鏈(α—helix)。其中4條β片層和1條α螺旋結(jié)</p><p>　　構(gòu)由α1區(qū)肽鏈形成，另4條β片層和1條α螺旋結(jié)構(gòu)由α2區(qū)肽鏈構(gòu)成，形成的結(jié)合槽的裂隙(cleft)大小約為25×10 ×11埃，可以結(jié)合9—11個(gè)氨基酸殘基

14、的肽段。這個(gè)結(jié)合槽很小，所以外來(lái)的蛋白質(zhì)抗原必需經(jīng)過(guò)剪切加工成9—11肽才能與MHC—Ⅰ分子結(jié)站合，進(jìn)而遞呈給T細(xì)胞而被識(shí)別?？乖呐cMHC—Ⅰ類(lèi)分子結(jié)合后形成持殊的空間結(jié)構(gòu)和表位(epitope)被T細(xì)胞受體(T cell receptor，TCR)識(shí)別并與之結(jié)合?？乖碾谋砦粸門(mén)CR的α和β鏈第三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(complementarity determining region)CDR3所識(shí)別。α和β鏈的CDR3區(qū)最為多樣性而MHC

15、—Ⅰ類(lèi)分子肽結(jié)合槽兩邊的α螺旋則與T細(xì)胞受體的CDR1和CDR2結(jié)合。α3的Ig樣區(qū)與細(xì)胞毒T細(xì)胞或稱(chēng)殺傷性T細(xì)胞(cytolytic T lymphocyte，CTL)的TCR的共受體(Co—receptor)CD8結(jié)合。這與MHC—I類(lèi)分子參與肽抗原介導(dǎo)的對(duì)靶細(xì)胞裂解殺傷作用相關(guān)(圖6—3)。β2m與α1、α2及α3區(qū)相互作用，對(duì)維持MHC—I類(lèi)分子膜外正常的空間構(gòu)象具有重要作用。β2m分子不是由</p><p&

16、gt;　　二、第二類(lèi)主要組織相容性抗原(MHC—Ⅱ)分子</p><p>　　1．MHC—Ⅱ類(lèi)分子的基本結(jié)構(gòu)</p><p>　　MHC—Ⅱ類(lèi)分子是由兩條非共價(jià)鍵相聯(lián)的多肽鏈構(gòu)成的：一條鏈長(zhǎng)約230個(gè)氨基酸殘基左右，另一條β鏈長(zhǎng)度也在230個(gè)氨基酸殘基左右。兩條鏈結(jié)構(gòu)非常相似(圖6—4)。α鏈相對(duì)分子質(zhì)量約為3．2×l04—3．4×104，β鏈相對(duì)分子質(zhì)量約為2．9&#

17、215;l04—3．2×104，α鏈較β鏈重，主要由于α鏈有兩個(gè)N連接的糖基化基團(tuán)，而β鏈僅有一個(gè)。每條鏈都分4個(gè)區(qū)，如α鏈由al、α2、跨膜區(qū)和胞質(zhì)區(qū)構(gòu)成。β鏈則由β1、β2、跨膜區(qū)和胞質(zhì)區(qū)構(gòu)成。α1、α2、β1及β2區(qū)各由約90個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，其中β1、β2、α2各含有一個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵。 MHC—Ⅱ類(lèi)分子的αl和β1區(qū)共同構(gòu)成與抗原肽結(jié)合的結(jié)構(gòu)域(peptide－binding domain)，與MHC—I類(lèi)分子的α1、α

18、2區(qū)構(gòu)成的肽結(jié)合區(qū)很相似，但Ⅱ類(lèi)分子是由兩條鏈構(gòu)成(圖6—4)。</p><p>　　2．MHC—Ⅱ類(lèi)分子的空間結(jié)構(gòu)與功能</p><p>　　1993年，Browm等對(duì)MHC—Ⅱ類(lèi)分子HLA—DRl用木瓜蛋白酶水解的膜外片段進(jìn)行X射線衍射晶象分析得知空間構(gòu)象與I類(lèi)分子基本相似?？乖慕Y(jié)合槽底部分別由α1及β1提供的8條反向平行的β折疊構(gòu)成。兩邊分別由αl和β1構(gòu)成α螺旋，但Ⅱ類(lèi)分子的抗原

19、肽結(jié)合槽兩端是開(kāi)放的，因此可以與較長(zhǎng)的抗原肽結(jié)合。10—30個(gè)氨基酸殘基以上的肽段可以突出到結(jié)合槽以外。MHC—Ⅱ類(lèi)分子結(jié)合抗原肽后，其肽表位與T細(xì)胞受體的CDR3結(jié)合，而Ⅱ類(lèi)分子肽結(jié)合槽兩邊的α螺旋則分別與TCR的CDRl和CDR2結(jié)合，形成MHC對(duì)T細(xì)胞的約束(restriction)。α2和β2區(qū)序列較為保守，與Ig恒定區(qū)同源，稱(chēng)Ig樣區(qū)。Ⅱ類(lèi)分子的該區(qū)域與T細(xì)胞表面的CD4分子結(jié)合。CD4是TCR的共受體．是輔助性T細(xì)胞(Th)

20、特征性表面標(biāo)記分子。因此MHC—Ⅱ類(lèi)分子具有與輔助性T細(xì)胞結(jié)合及抗原信號(hào)傳遞的限制性。MHC分子這些不同的特異性識(shí)別是發(fā)揮免疫功能的分子基礎(chǔ)。</p><p>　　三、肽與MHC分子結(jié)合的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)</p><p>　　肽與MHC分子是非共價(jià)鍵結(jié)合，兩者相互作用的解離常數(shù)Kd約為10－6mol／1，是可達(dá)到飽和的，結(jié)合速度慢解離速度更慢。肽和MHC之間的親和力較抗原與抗體之間的親和力低得多。

21、抗原與抗體相互作用的解離常數(shù)Kd為10－7～10－11mol／L，肽與MHC—Ⅱ類(lèi)分子達(dá)到飽和結(jié)合需15～30min。一旦結(jié)合，二者可保持結(jié)合狀態(tài)幾小時(shí)，甚至幾周時(shí)間。MHC—I類(lèi)分子與肽的解離速度很慢，有時(shí)甚至需要破壞β2m與α鏈的聯(lián)系才能將肽分開(kāi)。這種相對(duì)穩(wěn)定的構(gòu)象進(jìn)一步保證了與T細(xì)胞的相互作用。每一個(gè)MHC分子在同一時(shí)間里只能與一個(gè)肽結(jié)合，多種不同的肽可以與同樣的MHC分子結(jié)合。某一種肽與MHC復(fù)合物被T細(xì)胞識(shí)別的功能可因加入另一

22、種結(jié)構(gòu)相似的肽面板抑制。T細(xì)胞識(shí)別肽MHC復(fù)合物是高度特異的。不同肽與同一種MHC結(jié)合就可以形成不同的表位，可與不同的T細(xì)胞結(jié)合。因而能夠識(shí)別這些抗原表位的T細(xì)胞受體也有多種多樣，每種TCR只識(shí)別某種特定的與MHC結(jié)合的抗原肽?？乖姆N類(lèi)成千上萬(wàn)，也決定了體內(nèi)TCR及其相伴隨的T細(xì)胞克隆也有成千上萬(wàn)種。這就構(gòu)成了在同一個(gè)體內(nèi)，不同細(xì)胞之間的基因及其表型的高度多樣性(diversity</p><p>　　第二節(jié)

23、 主要組織相容性抗原基因結(jié)構(gòu)及遺傳</p><p>　　根據(jù)MHC分于結(jié)構(gòu)可以將MHC分子分為I類(lèi)、Ⅱ類(lèi)和Ⅲ類(lèi)，每一類(lèi)分子都有多個(gè)不同基因座位的基因編碼，它們結(jié)構(gòu)不同但功能有相似之處。如人的Ⅰ類(lèi)分子有A、B、C幾個(gè)主要基因座位，Ⅱ類(lèi)分子有DR、DQ、DP等主要幾個(gè)基因座位。在每一個(gè)人每個(gè)基因座</p><p>　　許多等位基因片段即復(fù)等位基因，由兩條同源染色體決定。MHC基因在人體細(xì)胞中呈

24、共顯性表達(dá)，而且不同座位的基因也可同時(shí)在一個(gè)細(xì)胞中表達(dá)。由于是復(fù)等位基因共顯性表達(dá)，所以在同—個(gè)體細(xì)胞表面可存在多種不問(wèn)的MHC分子。</p><p>　　一、MHC的遺傳及多態(tài)性 </p><p><b>　　1．單元型</b></p><p>　　在每一個(gè)個(gè)體、每一個(gè)基因座位上都有兩種可能的基因型和表型，當(dāng)然可以是相同的，也可以是不同的。由

25、于MHC基因位于同—條染色體上，其多基因座位上的基因型組合相對(duì)穩(wěn)定，很少發(fā)生同源染色體間交換，這就構(gòu)成了以單元型(haplotype，也稱(chēng)單倍型)為特征的遺傳。同一條染色體上緊密連鎖的—系列等位基因的特殊組合，稱(chēng)為單元型。例如某一個(gè)體HLA兩條染色體的單元型可能是A2B12和A1 B8，這兩個(gè)單元型基因存在于同一個(gè)體的體細(xì)胞中。共同組成該個(gè)體的基因型(genotype)。由于HLA是共顯性發(fā)達(dá)，所以個(gè)體的表型(phenotype)和基因

26、型相同，也為A1A12B8B12。</p><p>　　2．連鎖不平衡及單元型遺傳</p><p>　　HLA各基因并非完全隨機(jī)地組成單元型，某些基因常緊密的連鎖在一起、而另一些則不常連鎖在—起，這就呈現(xiàn)出連鎖不平衡(linkage diaequilibrium)。例如：在漢族人群中HLA-A2的基因頻率為0.30，B46的基因頻率為0.05，如果A、B基因座位上的基因隨機(jī)組合，則A2和B

27、46基因組成的單元型預(yù)期頻率應(yīng)該符合Hardy—Weinberg平衡定律。A2－B46單元型理論上頻率應(yīng)該為0.30×0.05=0.015，但是實(shí)際觀察值為0．04。這說(shuō)明HLA—A2和HLA—B46基因之間存在著連鎖不平衡，兩個(gè)數(shù)值相差0.04－0.015＝0.025。這個(gè)0.025數(shù)值被稱(chēng)為連鎖不平衡參數(shù)，用△表示。對(duì)于一個(gè)隨機(jī)婚配的群體來(lái)說(shuō)，認(rèn)識(shí)和了解連鎖不平衡參數(shù)，具有一定的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。在選擇器官移植供體時(shí)可對(duì)單元型

28、進(jìn)行推算。如已知DR基因型則根據(jù)單元型連鎖關(guān)系可以推測(cè)DQ的可能型別。這些緊密連鎖的MHC單元型各基因通常很少發(fā)生交換，并成簇地傳遞給下一代，形成了以單元型為特征的遺傳。</p><p><b>　　3．基因的多態(tài)性</b></p><p>　　MHC是目前發(fā)現(xiàn)的最具多態(tài)性的緊密連鎖的基因群，存在于所有脊椎動(dòng)物的基因組。MHC編碼的分子主要分為3類(lèi)，即Ⅰ類(lèi)分子，Ⅱ類(lèi)分

29、子和Ⅲ類(lèi)分子。每一類(lèi)基因都有許多基因座位。如人的HLA—I類(lèi)基因就有A、B、C、D、F、G、H等基因座位。Ⅱ類(lèi)基因至少有14個(gè)基因座位，主要基因座位有DR、DQ、DP等，每個(gè)座位又有許多等位基因，如人類(lèi)僅A座位就已經(jīng)發(fā)現(xiàn)至少有55個(gè)等位基因。這僅是對(duì)人類(lèi)部分群體的初步調(diào)查分析結(jié)果。人群中基因雖具有高度多態(tài)性，但每個(gè)人對(duì)每個(gè)基因座位上最多取用兩種等位基因。這兩個(gè)等位基因可能相同也可能不同。由干基因座位較多，而每一種基因座位又有多種取用的可

30、能性，因此這種多座位及其不同等位基因的組合，可以形成群體中數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的基因型和表型。不同的個(gè)體，我們甚至存幾萬(wàn)個(gè)個(gè)體中找不到一對(duì)HLA基因型和表型完全相同的人。這種高度多態(tài)性的基因群的形成是也長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中基因突變和環(huán)境中多樣性抗原的選擇壓力(selective pressure)下形成的。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)人的HLA的某些基因型與一些疾病易感性有關(guān)，而另一些基因型與某些疾病的抗性有關(guān)。例如：HLA－Ⅱ類(lèi)的DRB1﹡0401基因與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎&l

31、t;/p><p>　　二、小鼠MHC(H－2)基因結(jié)構(gòu)</p><p>　　小鼠是常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，所有我們應(yīng)該對(duì)小鼠的MHC（即H－2）結(jié)構(gòu)有一定了解。1948年，George Snell 首先把小鼠與組織移植排斥有關(guān)的抗原命名為組織相容性抗原，編碼這些抗原的基因稱(chēng)為組織相容性基因（histocompatibility gene），即H基因。由于在先前的研究中發(fā)現(xiàn)小鼠血型抗原主要有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、

32、Ⅳ型，而Ⅱ型被證實(shí)就是組織相容型抗原，其基因就是H－2。后來(lái)George Snell 通過(guò)進(jìn)一步研究確定H－2基因與已知的位于第17號(hào)染色體斷臂上控制鼠尾的T－1基因連鎖（T為有尾，t為無(wú)尾）。證明H－2基因定位于17號(hào)染色體斷臂上，約2000kb長(zhǎng)，由4個(gè)主要區(qū)域組成，即K、I、S、D（圖6－6）。其中I區(qū)又可分為兩個(gè)亞區(qū)（subregion），即I-A和I-B。在每個(gè)區(qū)或亞區(qū)內(nèi)又有許多基因座位（locus）。D區(qū)有H－2D和H－2L

33、兩個(gè)基因座位。I－A亞區(qū)有Aα和Aβ兩個(gè)基因座位。I－E亞區(qū)含Eα和Eβ兩個(gè)基因座位。S區(qū)有6個(gè)基因座位。從基因類(lèi)別來(lái)說(shuō)，K和D為MHC－Ⅰ類(lèi)基因，I區(qū)為Ⅱ類(lèi)基因，S區(qū)為Ⅲ類(lèi)基因，主要編碼補(bǔ)體，C4、C2、B因子（Bf），性限制蛋白（Slp</p><p>　　H－2單元型（H－2 haplotype）純種小鼠是研究MHC的重要?jiǎng)游锬Ｐ汀Ｒ粋€(gè)大約經(jīng)過(guò)20代近親交配繁殖的小鼠，其中H－2符合物各等位基因連鎖在一起。

34、這些連鎖的H－2各等位基因共同構(gòu)成小鼠的H－2單元型。單元型位于一條染色體上，并給予一個(gè)代號(hào)，例如：C57bI/10小鼠的單元型是H－2b，BALB/C鼠的單元型是H－2d（表6－2）。了解單元型對(duì)研究MHC的結(jié)構(gòu)和功能很有幫助。</p><p>　　小鼠的MHC長(zhǎng)度約0.5—1.0厘摩(centimorgan，cM)。不同基因型可出現(xiàn)重組。這種重組交換(crossover)可以發(fā)生在染色體任何位置?？梢杂貌煌瑔?/p>

35、元型的鼠之間交配繁殖，以分析其重組交換值。MHC各基因座位之間重組可能產(chǎn)生新的單元型。</p><p>　　三、人的MHC（HLA）基因結(jié)構(gòu)</p><p>　　人的MHC又稱(chēng)HLA基因，位于第六號(hào)染色體短臂上，長(zhǎng)約4000kb(相當(dāng)于大腸桿菌整個(gè)基因組的長(zhǎng)度)。在經(jīng)典遺傳學(xué)中，這么長(zhǎng)的基因片段相當(dāng)于4cM，這意味著個(gè)體MHC之間的雜交有4％以上的重組率。HLA基因有幾十個(gè)基因座位(圖6—

36、7)。按結(jié)構(gòu)功能和組織分布情況不同分為3類(lèi)：</p><p>　　1．HLA—I類(lèi)基因</p><p>　　在遠(yuǎn)離著絲點(diǎn)約2000—4000kb的范圍內(nèi)，經(jīng)典的Ⅰ類(lèi)分子基因有A、B、C基因座位，每個(gè)基因座位又有幾十個(gè)以上的等位基因，見(jiàn)表6—3和圖6—8。在J類(lèi)區(qū)還發(fā)現(xiàn)E、F、G、H、J等基因座位，稱(chēng)為I類(lèi)樣基因(class Ⅰ－like genes)：它們編碼MHC—I B分子，這些分子也

37、是可以與β2m微球蛋白結(jié)合的膜蛋白，確切的功能尚在研究之中。</p><p>　　2．HLA—Ⅱ類(lèi)基因</p><p>　　在近著絲點(diǎn)的1000kb范圍內(nèi)，經(jīng)典Ⅱ類(lèi)分子主要有DQ、DR、DP等基因座位。由于Ⅱ類(lèi)分子是由兩條鏈(α、β鏈)編碼。每條鏈又有多個(gè)基因座位，如：DPA編碼DP分子α鏈，有DPAl和DPA2。DPB編碼DP分子β鏈，又有DPBl和DPB2。這些基因每個(gè)座位又可能有許多

38、等位基因(表6—3)。 HLA—Ⅱ類(lèi)分子由α鏈和β鏈組成的異二聚體。α鏈基因有4個(gè)外顯子構(gòu)成，β鏈基因由6個(gè)外顯子構(gòu)成。 HLA—Ⅱ類(lèi)基因具有高度多態(tài)性(圖6—8)，這些多態(tài)性的產(chǎn)生主要由第二個(gè)外顯子編碼的(α1或β1區(qū))氨基酸序列差異性所決定的。</p><p>　　3．HLA—Ⅱ類(lèi)基因區(qū)的LMP和TAP基因</p><p>　　值得重視的是近年來(lái)在Ⅱ類(lèi)基因區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)了多個(gè)與內(nèi)源性抗原加

39、工處理和遞呈有關(guān)的基因。如：抗原肽運(yùn)載體基因(transporters of antigen peptides，TAP)和蛋白酶體(proteasome)基因，即巨大多功能蛋白酶（large multifunctional proteinase，LMP）或稱(chēng)為低相對(duì)分子質(zhì)量多肽(low molecular mass polypeptide)基因。它們的表達(dá)與Ⅱ類(lèi)基因同受干擾素的調(diào)控，且與內(nèi)源性抗原加工和遞呈有關(guān)。由于內(nèi)源性抗原主要由I類(lèi)

40、基因遞呈的，因而說(shuō)明這些蛋白的功能與I和Ⅱ類(lèi)基因都高度相關(guān)。</p><p>　　LMP是胞質(zhì)非糖基化蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量很大，為5．8×105組成的一個(gè)形似長(zhǎng)筒狀的復(fù)合物。每條多肽鏈(亞基)相對(duì)分子質(zhì)量約為2.0×104—3.5×l04，是真核細(xì)胞中普遍存在的蛋白酶體。這種蛋白酶體有非溶酶體降解蛋白作用，也稱(chēng)多催化活性蛋白酶復(fù)合物。它是一巨大胞內(nèi)的蛋白酶，是由MHC—Ⅱ類(lèi)區(qū)LMP2和

41、LMP7基因編碼的。LMP2基因的開(kāi)放閱讀框編碼一個(gè)長(zhǎng)219氨基酸殘基的蛋白產(chǎn)物。LMP7編碼的蛋白質(zhì)有208個(gè)殘基。內(nèi)源性抗原指胞質(zhì)內(nèi)合成的蛋白抗原、經(jīng)過(guò)LMP降解成肽段(通常為8—11肽)后，不具有信號(hào)肽(signal peptide)結(jié)構(gòu)。這種肽段要進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與新合成MHC—I類(lèi)分子結(jié)合需要在TAP的幫助下才能完成。 MHC—I類(lèi)分子只有與抗原肽結(jié)合后才能表達(dá)于細(xì)胞表面，將抗原肽遞呈給Tc淋巴細(xì)胞，誘發(fā)特異性免疫應(yīng)答。有一種TAP

42、基因突變的B細(xì)胞瘤的細(xì)胞株，其表面則不能表達(dá)MHC—I類(lèi)分子。而TAP屬于ABC(TAP－bindingcassette)超基因家族成員、TAP是位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的膜蛋白。它以TAPl和TAP2異二聚體形式發(fā)揮作用。目前已確認(rèn)的TAP1至少有5種基因型，TAP</p><p>　　4．HLA—Ⅲ類(lèi)基因</p><p>　　在第六號(hào)染色體近著絲點(diǎn)1000—2000kb范圍內(nèi)，位于I類(lèi)基因和Ⅱ類(lèi)基

43、因之間。該區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)有基因座位60多個(gè)，部分基因功能已經(jīng)清楚，但仍有相當(dāng)部分在研究之中。已發(fā)現(xiàn)的基因有補(bǔ)體C2、C4、Bf(見(jiàn)第四章)、腫瘤壞死因子基因(TNF)、淋巴毒素(LT)、21羥化酶(21—hydroxylaseA、B)基因和熱體克蛋白70基因(heat shock protein70，HSP70)。就目前研究結(jié)果看，Ⅲ類(lèi)區(qū)基因在免疫應(yīng)答和調(diào)控中也起著相當(dāng)重要的作用，值得深入研究。</p><p>　　

44、四、HLA的發(fā)現(xiàn)及基因的命名</p><p>　　1958年J．Dausset在多次輸過(guò)血病人體內(nèi)檢出含白細(xì)胞抗體的血清。他所試的27份這種血清樣本中行20份樣本幾乎能與所有的供血者的白細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)，另外7份樣本只能與大約60％的法國(guó)人的白細(xì)胞反應(yīng)，而不能與這7位病人自身的白細(xì)胞起凝集反應(yīng)。他把這7份血清中的抗體稱(chēng)為Mac抗體。當(dāng)Mac抗原陰性的病人接受Mac抗原輸血后便誘發(fā)產(chǎn)生抗Mac抗體。家系調(diào)查中表明M

45、ac抗原酌遺傳遵守孟德?tīng)柖伞＿@就是首次發(fā)現(xiàn)人的白細(xì)胞抗原，后來(lái)命名為HLA—A2抗原。1964年友Amos倡導(dǎo)下，舉行了第一屆國(guó)際組織相容性專(zhuān)題討論會(huì)(International Histocompatibility Workshop&conference，IHWC)。在1968年第三屆IHWA后，在世界衛(wèi)生組織（WHO）的支持下，成立了 HLA命名委員會(huì)。對(duì)HLA特異性命名，通常在基因座位后加上數(shù)字，數(shù)字代表不同等位甚因，如

46、：HLA—A2，HLA—A11，HLA—B27，H LA—DR4等。HLA的定型以往主要有血清學(xué)和細(xì)胞學(xué)方法。有些座位所用的定型方法很局限，且僅在小范圍內(nèi)異體等位基因抗血清定型發(fā)現(xiàn)的，這些仍需要進(jìn)一步鑒</p><p>　　HLA基因型的確定由于DNA序列的分析已經(jīng)相當(dāng)精確，每個(gè)座位每個(gè)型的特異性通常又有許多等位基因，如HLA—Ⅰ類(lèi)等位基因命名A﹡1101、A﹡1102、B﹡2701，這表示“座位名／﹡/型特異性

47、／等位基因序號(hào)”。HLA—Ⅱ類(lèi)基因由于有編碼α鏈和β鏈之分，所以基因命名與I類(lèi)不同，在基因座位名上要注明A(α鏈)或B(β鏈)。有時(shí)編碼α鏈或β鏈各有幾個(gè)基因座位，則分別以序號(hào)綴后，如：DQA1﹡0401，DQA2﹡0101，DQB1x 0201，DRBl﹡0302，DRB3﹡0101等。這些通過(guò)GenBank都可以檢索到DNA序列和蛋白質(zhì)序列。</p><p>　　HLA—Ⅲ類(lèi)抗原主要是—些可溶性分子，其分型不

48、同于HLA—Ⅰ、Ⅱ類(lèi)抗原，是由補(bǔ)體遺傳專(zhuān)題討論會(huì)(Complement Genetics Workshop&Conference，CGWC)命名的。</p><p>　　第三節(jié) MHC的檢測(cè)原理及應(yīng)用</p><p>　　MHC的檢測(cè)包括表型(phenotype)檢測(cè)和基因型(genotype)檢測(cè)。對(duì)MHC及其表達(dá)產(chǎn)物</p><p>　　的檢測(cè)無(wú)論是對(duì)

49、臨床分析和實(shí)際應(yīng)用，還是免疫遺傳學(xué)研究都具有重要價(jià)值。20世紀(jì)80年代前對(duì)MHC的檢測(cè)是以血清學(xué)和細(xì)胞學(xué)方法為基礎(chǔ)的表型分析為主，這些經(jīng)典方法檢測(cè)準(zhǔn)</p><p>　　確性和重復(fù)性常令人不太滿意。由于MHC是共顯性基因，基因型通常與表型是—致的(假基因例外)，所以近十幾年來(lái)血清學(xué)和細(xì)胞學(xué)方法有被DNA水平上的基因定型方法取代的趨勢(shì)?；蚨ㄐ头椒ㄔ跍?zhǔn)確性和重復(fù)性方面都較好。下面以H LA為例介紹MHC分型技術(shù)及其

50、應(yīng)用。</p><p>　　一、HLA—I類(lèi)抗原的檢測(cè)</p><p>　?、耦?lèi)抗原(A、B、C基因座位上)的檢測(cè)，國(guó)際上常規(guī)使用補(bǔ)體依賴(lài)的微量淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)(complement dependent cytotoxicity test，CDC)。它是依據(jù)型特異性抗體介導(dǎo)的補(bǔ)體系統(tǒng)對(duì)靶細(xì)胞溶解的原理進(jìn)行的。試驗(yàn)必須有抗HLA標(biāo)準(zhǔn)血清(抗體)。這些標(biāo)難分型血清中抗體與待檢淋巴細(xì)胞上相應(yīng)的HL

51、A結(jié)合，使抗體分子的空間構(gòu)象(conformation)改變面暴露補(bǔ)體結(jié)合部位，此時(shí)加入的補(bǔ)體(通常是兔補(bǔ)體)被活化使淋巴細(xì)胞膜上形成孔道面導(dǎo)致細(xì)胞死亡。隨后加人細(xì)胞染液，如伊紅或臺(tái)盼藍(lán)，受損或死亡的細(xì)胞可被染色，即為細(xì)胞毒陽(yáng)性，說(shuō)明待檢個(gè)體的HLA抗原型類(lèi)與已知標(biāo)準(zhǔn)HLA血清型一致。如果細(xì)胞未受損，活的細(xì)胞不被染色，則為陰性，說(shuō)明HLA型別與標(biāo)準(zhǔn)血清不一致。</p><p>　　這種方法常遇到的問(wèn)題是標(biāo)準(zhǔn)血清來(lái)

52、源困難及是否標(biāo)準(zhǔn)的問(wèn)題。這些血清多取自經(jīng)產(chǎn)婦或接受標(biāo)準(zhǔn)HLA抗原免疫的志愿者血清。</p><p>　　二、HLA—Ⅱ類(lèi)抗原的檢測(cè)</p><p>　?、蝾?lèi)抗原的DR、DQ分型方法與I類(lèi)基本相同。不同的是由于Ⅱ類(lèi)抗原主要表達(dá)于B細(xì)</p><p>　　胞從各種抗原遞呈細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞等。因此在檢測(cè)時(shí)首先要分離這些細(xì)胞，一般都用分離的B細(xì)胞。但由于I類(lèi)抗原表達(dá)于所有的

53、有核細(xì)胞，所以B細(xì)胞表面除有Ⅱ類(lèi)抗原外，還有I類(lèi)A、B、C抗原。在檢測(cè)時(shí)所用的標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ類(lèi)DR、DQ分型血清，必須先用多個(gè)個(gè)體血小板混合物吸收除去I類(lèi)抗體。其余操作方法與I類(lèi)相同。</p><p>　　對(duì)DP和Dw特異性進(jìn)行檢測(cè)不能用上述CDC法，要用細(xì)胞學(xué)方法分型。方法的原理基于混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(mixed lymphocyte reaction，MLR)。同種異體淋巴細(xì)胞的HLA—DP、Dw抗原不同時(shí)，將兩種淋巴

54、細(xì)胞混合培養(yǎng)，將會(huì)刺激對(duì)方細(xì)胞發(fā)生分裂增殖反應(yīng)，通過(guò)檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖的程度來(lái)了解兩者抗原同源性程度。實(shí)際操作中常采用單向MLR方法和預(yù)致敏淋巴細(xì)胞分型法(primed lymphocyte typing，PLT)</p><p><b>　　1．單向MLR</b></p><p>　　將已知HLA型別的標(biāo)準(zhǔn)定型細(xì)胞(通常為純合子分型細(xì)胞，homozygote typi

55、ng cell，HTC)事先以絲裂霉素C(mitomycin C)處理或經(jīng)2000rad強(qiáng)度的X射線照射處理，使標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞失去增殖能力，但仍保持完整的細(xì)胞形態(tài)和抗原性。以此處理過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞與待檢淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)5—6d，在終止前16—20 h，加3H—TdR(氚標(biāo)胸腺嘧啶核苷)，收集細(xì)胞，以液體閃爍計(jì)數(shù)儀測(cè)定同位素?fù)饺肭闆r(cpm數(shù))。以處理過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞與其自身細(xì)胞做同樣的細(xì)胞混合試驗(yàn)為對(duì)照，計(jì)算出刺激指數(shù)SI(stimulation i

56、ndex)。</p><p><b>　　實(shí)驗(yàn)組cpm </b></p><p><b>　　SI= ————</b></p><p><b>　　對(duì)照組cpm</b></p><p>　　當(dāng)SI＜2時(shí)為陰性，表明二者HLA—Dw或DP型相向。同胞兄妹中呈這種陰性反應(yīng)的為理想

57、的移植供體。如果有一個(gè)單元型不一致的同胞兄抹MLR，建議的SI極限值可達(dá)10。大于此值則不能用于器官移植供體。2個(gè)單元型完全不一致的非親緣關(guān)系個(gè)體之間SI值可達(dá)25以上。此外，也有人用相對(duì)應(yīng)答(RR)為指標(biāo)來(lái)表示型別差異的情況。</p><p>　　2．預(yù)致敏淋巴細(xì)胞分型法(PLT)</p><p>　　單向MLR法操作時(shí)間太長(zhǎng)，而且HTC標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞來(lái)源困難，于是發(fā)明了PLT分型法。該法原理

58、是將標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞HTC與另一不相關(guān)個(gè)體淋巴細(xì)胞作單向MLR法培養(yǎng)，時(shí)間延長(zhǎng)到9—14d，反應(yīng)細(xì)胞的分裂增殖逐漸停止，而出現(xiàn)形態(tài)上靜止的小淋巴記憶細(xì)胞，稱(chēng)之為處理細(xì)胞。這種細(xì)胞就是預(yù)致敏淋巴細(xì)胞。這種細(xì)胞可以進(jìn)行凍存?zhèn)溆?。?dāng)這種細(xì)胞再次與第一次培養(yǎng)時(shí)相同的抗原細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，則迅速出現(xiàn)二次反應(yīng)。 24h即可表現(xiàn)快速增殖，可以節(jié)省大量時(shí)間和HTC標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞。結(jié)果的分析也用3H—TdR摻入法，但以陽(yáng)性結(jié)果定為與HTC型別相同(有人稱(chēng)之為“陽(yáng)性分型法”

59、)。而單向MLR定型法是以陰性結(jié)果表明與HTC型別相同(又稱(chēng)為“陰性定型法”)。</p><p>　　三、HLA基因定型法</p><p>　　1991年第11屆國(guó)際HLA專(zhuān)題討論會(huì)上提出了HLA的DNA分型(DNA typing)方法，這類(lèi)方法近年來(lái)在研究和實(shí)際應(yīng)用方面發(fā)展非?？欤腥〈渌椒ǖ内厔?shì)。</p><p>　　1．限制性內(nèi)切酶酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性(re

60、striction fragment length polymorphism)檢測(cè)法</p><p>　　不同的HLA基因型的DNA堿基序列是不同的，這些不同的序列可能被不同的限制性內(nèi)切酶識(shí)別，則形成不同長(zhǎng)度的酶切片段。在酶切后電泳并以相應(yīng)的基因探針雜交，與標(biāo)準(zhǔn)基因型對(duì)照，即可得知檢測(cè)的結(jié)果。以往常采用白細(xì)胞基因組DNA直接酶切并雜交分析， 但因基因組太大，太復(fù)雜，酶切位點(diǎn)或是太多而使片段混雜或是太少不能精確區(qū)

61、分，而且必須要與標(biāo)記的探針雜交分析相結(jié)合才能完成這種方法，實(shí)際應(yīng)用時(shí)太繁瑣。近年來(lái)，由于聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)的應(yīng)用，使方法有了較大進(jìn)展。目前發(fā)展起來(lái)的PCR－RFLP分型法是—個(gè)簡(jiǎn)便快速的分型方法。首先在要分型的基因兩端保守區(qū)選擇設(shè)計(jì)一對(duì)或幾對(duì)引物，然后以PCR擴(kuò)增該區(qū)段的DNA，得到等長(zhǎng)的DNA 擴(kuò)增片段。再選擇適當(dāng)?shù)南拗菩詢?nèi)切酶對(duì)該片段酶切，得到不同長(zhǎng)度的片段，電泳就可直接觀察到不同的條帶類(lèi)型。從已知DNA序列即可推測(cè)該個(gè)體的

62、基因型。如果格局與已知的不一致，則可能是一種新的等位基因。</p><p>　　2．PCR—ASO(或PCR－SSO)法</p><p>　　是PCR方法與等位基因特異性寡核苷酸(allele specific oligonuceotide，ASO)探針或順序特異性寡核苷酸(sequence specific oligonucleotide，SSO)探針雜交法。先以PCR擴(kuò)增待分析的基因片

63、段，擴(kuò)增的產(chǎn)物點(diǎn)樣固定于尼龍膜(或硝酸纖維膜)，然后以同位素或非放射件標(biāo)記的探針與之雜交，根據(jù)陽(yáng)性斑點(diǎn)判斷個(gè)體基因型。出了HLA等位基因非常多，就需要很多的探針對(duì)每個(gè)DNA樣品要進(jìn)行多次雜交(甚至十幾次)才能完成定型分析，操作也十分繁瑣。于是在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)一種反向雜交法(reverse hyhridization)。將各種不向的探針固定于同一張膜上，再將PCR產(chǎn)物標(biāo)記，以PCR產(chǎn)物(待檢測(cè)基因DNA)反過(guò)來(lái)與探針雜交。這樣做的好處是

64、只要進(jìn)行一次雜交，即可完成多個(gè)等位基因分析，但不同探計(jì)的雜交條件的統(tǒng)一非常重要(如溫度，離子強(qiáng)度等)。</p><p>　　3．PCR—DNA sequencing(即PCR產(chǎn)物自接DNA測(cè)序)法</p><p>　　以PCR擴(kuò)增所要分析的基因片段，然后，直接對(duì)DNA進(jìn)行序列分析，可以直接得到基因型別。近年來(lái)由于DNA測(cè)序儀的自動(dòng)化程度不斷提高，大大的方便了HLA的基因分型。</p&

65、gt;<p>　　四、HLA檢測(cè)的應(yīng)用</p><p>　　HLA的分型和檢測(cè)對(duì)人類(lèi)免疫遺傳學(xué)研究非常重要，對(duì)了解人類(lèi)各民族起源和遷徙及臨床醫(yī)學(xué)實(shí)踐和法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別都非常重要。實(shí)際應(yīng)用中主要有以下幾方面：</p><p><b>　　1器官移植配型</b></p><p>　　同種異體器官移植(allograft)時(shí)，供體與受體之

66、間 HLA不同，則會(huì)產(chǎn)生排斥反應(yīng)。因而需要在人群中通過(guò)HLA配型來(lái)選擇供體。同卵雙生的同胞之間HLA型完全相同，移植物可以長(zhǎng)期存活。在家庭內(nèi)選擇供器官者，兩者通常會(huì)有一個(gè)單元型相同，排斥反應(yīng)就會(huì)較無(wú)親緣關(guān)系的供體弱。在具有多個(gè)供體可供選供的情況下，通過(guò)HLA定型分析可以選擇最人程度相配者，即同源性最高者。有關(guān)問(wèn)題我們將在后面討論(見(jiàn)第十章)。</p><p>　　2．與疾病易感性的關(guān)系</p>&l

67、t;p>　　早在20世紀(jì)60年代后湖，人們就注意到HLA與某些免疫性疾病相關(guān)，如90％以上的強(qiáng)直性脊椎炎患者帶有HLA—B27抗原，而正常人B27攜帶者只有6％左右。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人DR4基因攜帶為47％，而正常人只有17％(中國(guó)人群)。世界各國(guó)學(xué)者大約對(duì)500多種疾病進(jìn)行了關(guān)聯(lián)分析，巳發(fā)現(xiàn)有60多種疾病與HLA有關(guān)聯(lián)。這些病大多數(shù)病因和機(jī)理不清某種疾病與HLA型別的相關(guān)性通常用相對(duì)危險(xiǎn)性(relative risk，RR)來(lái)評(píng)

68、估，其計(jì)算公式為：</p><p><b>　　P＋×C－</b></p><p>　　RR＝ ―――</p><p><b>　　P—×C＋</b></p><p>　　式中P＋代表具有某種抗原的病人數(shù)，P—代表不帶此抗原的病人數(shù)，C—為不帶此抗原的正常對(duì)照組人數(shù)，C＋

69、為攜帶此抗原的正常對(duì)照組人數(shù)。RR＝1時(shí)，兩者無(wú)關(guān)聯(lián)，若RR＝4，則認(rèn)為該病與這種HLA型肯定相關(guān)。RR值越大，該抗原攜帶者患某種病的危險(xiǎn)性也越大。當(dāng)RR值小于1時(shí)，表明該基因型對(duì)這種病有抗性。表6—4中列出了部分疾病與HLA的相關(guān)性。</p><p>　　HLA與疾病易感性的關(guān)系機(jī)理仍很不情楚。已提出的一些主要的學(xué)說(shuō)有：①分子模擬學(xué)說(shuō)，即HLA抗原與致病因子抗原分子相似，因結(jié)構(gòu)相似而遭免疫系統(tǒng)自身攻擊，或因病原

70、分子結(jié)構(gòu)與HLA分子太相似而不能被識(shí)別而逃避免疫，以致身體受致病因子攻擊；②受體學(xué)說(shuō)，認(rèn)為HLA分子就是某病原的受體；③基因連鎖學(xué)說(shuō)，認(rèn)為還存在其他易感基因，而HLA僅是一個(gè)被檢出的易感基因連鎖的遺傳標(biāo)志。</p><p><b>　　小 結(jié)</b></p><p>　　主要組織相容性復(fù)合物是脊椎動(dòng)物體內(nèi)最復(fù)雜又具有高度多態(tài)性的基因群，1948年George S

71、nell首次發(fā)現(xiàn)小鼠MHC即H一2，1958年Dausset發(fā)現(xiàn)了人的MHC即HLA基因。</p><p>　　MHC的表達(dá)產(chǎn)物稱(chēng)為主要組織相容性抗原，MHC抗原是有核細(xì)胞表面膜蛋白分子，對(duì)抗原遞呈和免疫信號(hào)傳遞起關(guān)鍵作用。MHC分子其膜外抗原結(jié)合槽可結(jié)合8—30肽以上長(zhǎng)度的抗原肽片段，并與T細(xì)胞表而TCR結(jié)合，活化T細(xì)胞、啟動(dòng)免疫應(yīng)答。MHC—抗原肽復(fù)合物對(duì)TCR的識(shí)別是高度特異性的，抗原肽的高度多樣性相對(duì)應(yīng)于

72、TCR的高度多樣性，也就是說(shuō)MHC與某種抗原肽結(jié)合只能將信號(hào)傳遞給某一特定的TCR，活化相應(yīng)的T細(xì)胞克隆，是MHC限制性(restriction)識(shí)別的概念之一。MHC限制性還表現(xiàn)在個(gè)體特異性和種的特異性。不同個(gè)體之間及不同物種之間MHC差異很大時(shí)，則無(wú)法形成MHC—肽—TCR三元體遞呈抗原信息。MCH的限制性還表現(xiàn)在對(duì)自身T細(xì)胞亞群識(shí)別限制。MHC分子主要分為I類(lèi)和Ⅱ類(lèi)分子。I類(lèi)分子表達(dá)在所有有核細(xì)胞表面，主要由α鏈和非MHC編碼的β

73、2m構(gòu)成，其主要功能是遞全呈內(nèi)源性(細(xì)胞內(nèi)合成的)抗原給CD8＋T細(xì)胞亞群，呈現(xiàn)MHC—I類(lèi)限制性識(shí)別。Ⅱ類(lèi)分子表達(dá)于APC表面(B細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等)，主要將外源性(由細(xì)胞外經(jīng)吞噬、胞飲加工的)抗原遞呈給CD4＋Th細(xì)胞亞群，呈現(xiàn)MHC—Ⅱ類(lèi)限制性識(shí)別</p><p>　　MHC的遺傳特點(diǎn)主要表現(xiàn)為高度多態(tài)性，有多個(gè)基因座位，每個(gè)座位在群體中又有許多個(gè)等位基因，且呈共顯性表達(dá)。各基因座位連鎖不平衡，并以單元型

74、遺傳給下一代。MHC的表型又稱(chēng)組織型，器官移植時(shí)組織型相同才不會(huì)出現(xiàn)排斥反應(yīng)。MHC的定型方法有基因定型和表型定型。由于MHC是共顯性表達(dá)，基因定型可以代替表型定型。表型定型檢測(cè)方法有CDC法，單向MLR、PLT法等。DNA基因密碼水平的定型檢測(cè)．主要有PCR—ASO法、PCR—RELP法及PCR—DNA直接測(cè)序法。研究MHC對(duì)了解免疫應(yīng)答及抗原遞呈的分子機(jī)理、器官移植配型與疾病易感性的關(guān)系及法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別均有重要意義。</p&g

75、t;<p><b>　　練習(xí)</b></p><p><b>　?、衩~解釋</b></p><p>　　1．MHC；2 β2m；3 單元型；4 連鎖不平衡；5 LMP；6 TAP；7 MLR；8 PLT；9 刺激指數(shù)；10 陽(yáng)性定型法</p><p><b>　?、蛩伎碱}</b><

76、;/p><p>　　1．MHC—I類(lèi)分子和MHC—Ⅱ類(lèi)分子的結(jié)構(gòu)、功能及表達(dá)狀況有哪些不同？</p><p>　　2．你認(rèn)為MHC的限制性有哪些內(nèi)容，并說(shuō)明其生理意義。</p><p>　　3．以MHC、抗原及TCR為例解釋多態(tài)性（polymorphism）和多樣性（diversity）這兩個(gè)概念及其生理意義。</p><p>　　4．HLA—I

77、類(lèi)和HLA—Ⅱ類(lèi)分子的分型檢測(cè)方法有何不同，為什么？</p><p>　　5．學(xué)習(xí)和研究MHC有哪些重要意義？</p><p>　　啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊

78、啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊主要組織相容性復(fù)合物啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊