OsLIR1參與水稻碳磷平衡的機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、植物養(yǎng)分吸收、轉(zhuǎn)運與利用都受到植物內(nèi)源周期節(jié)律的調(diào)控。本研究通過分析水稻磷信號中心調(diào)控因子PHR2基因超表達植株OsPHR2(O)與RNAi干涉植株OsPHR2(RI)基因芯片數(shù)據(jù),篩選到一個與植物內(nèi)源節(jié)律相關(guān)的基因OsLIR1,該基因在OsPHR2(O)轉(zhuǎn)基因材料中,表達受到抑制,而在OsPHR2(RI)轉(zhuǎn)基因材料中變化不明顯。通過對其基因功能的研究,得到以下結(jié)論:
   1、水稻OsLIR1基因表達受光周期調(diào)控,在光照結(jié)束時

2、表達最高,黑暗條件下表達逐漸降低,并在次日光照前達到最低值;該基因在葉片中呈高豐度表達,在根里表達則相對較低;葉與根中,其表達均受到缺磷抑制,尤其在根中抑制強烈。
   2、通過OsLIR1::GFP融合蛋白在洋蔥表皮與煙草葉中的瞬時表達得知該蛋白定位于質(zhì)體與葉綠體;分析OsLIR1基因啟動子接GUS報告基因的轉(zhuǎn)基因材料表明,其在根尖,根的皮層細(xì)胞,莖的皮層細(xì)胞以及葉肉細(xì)胞,穗的穎殼中均有表達。
   3、35S接OsL

3、IR1基因超表達與RNAi干涉轉(zhuǎn)基因植株表現(xiàn)為生長受到抑制,花粉活力降低,結(jié)實率減少和葉尖早衰的現(xiàn)象。
   4、對OsLIR1基因超表達與RNAi干涉植株體內(nèi)磷含量的測定發(fā)現(xiàn),其有效磷與全磷較野生型均有顯著升高,表現(xiàn)為磷積累。在正常供磷下,定量PCR分析表明:OsLIR1增強與干涉轉(zhuǎn)基因植株中磷酸鹽轉(zhuǎn)運體OsPT2、OsPT6、OsPT8和OsPT9的表達均上調(diào),磷信號響應(yīng)基因OsSQD2、OsPAP10、OsIPS、OsPH

4、02的表達變化不顯著,除了OsmiR399d在低表達點與高表達點均受抑制。
   5.測定OsLIR1基因超表達植株與RNAi干涉植株體內(nèi)淀粉和蔗糖含量,得知在光照前,OsLIR1增強與干涉轉(zhuǎn)基因植株淀粉與蔗糖含量與野生型相比均顯著升高。在光照結(jié)束時,轉(zhuǎn)基因株系的蔗糖和淀粉含量與野生型相比無明顯差異,結(jié)果顯示該基因可能參與調(diào)控葉中瞬時淀粉在夜間的降解。
   6.通過分析OsLIR1基因超表達植株與RNAi干涉植株中植物

5、內(nèi)源節(jié)律基因OsCCA1,OsTOC1,OsPCL1的表達,發(fā)現(xiàn)夜晚基因OsTOC1,OsPCL1的表達振幅在OsLIR1增強與干涉轉(zhuǎn)基因株系中顯著降低,而早晨基因OsCCA1的表達則沒有受到影響。因此認(rèn)為該基因可能處于植物內(nèi)源節(jié)律調(diào)控系統(tǒng)的夜晚反饋環(huán)中,對夜晚基因的表達具有調(diào)控作用。
   OsLIR1基因作為植物內(nèi)源節(jié)律基因,參與了植物體內(nèi)的碳平衡和磷平衡,因此研究該基因的功能對我們研究周期節(jié)律與碳磷平衡之間的關(guān)系有著重要的

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