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![寧夏靈武白芨灘國家級自然保護區(qū)苦豆子內(nèi)生真菌多樣性及其抑菌活性物質(zhì)研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/2381345c-0603-46dd-ae34-4e9b03d57636/2381345c-0603-46dd-ae34-4e9b03d576361.gif)
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文檔簡介
1、植物內(nèi)生真菌普遍存在于目前發(fā)現(xiàn)的各種陸生及水生植物中,其多樣性受多種因素的影響。不同的區(qū)域或位點、氣候條件、植被等均可影響內(nèi)生真菌類群的多樣性。研究發(fā)現(xiàn),藥用植物中蘊含著大量的有益內(nèi)生真菌,這些內(nèi)生真菌與宿主之間具有緊密的生態(tài)關系,其產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物在醫(yī)藥、植物病蟲害生物防治等方面的用途逐漸增大,成為尋找新的天然活性產(chǎn)物的重要方向。本文以寧夏干旱荒漠區(qū)重要的沙生藥用植物苦豆子為研究對象,進行了內(nèi)生真菌的分離鑒定、多樣性分析以及抑菌高活
2、性菌株的篩選研究,結果如下:
1、從采自寧夏干旱荒漠區(qū)的6種沙生藥用植物苦豆子(Sophora alopecuroides L.)、老瓜頭(Cynanchum komarovii)、膿瘡草(Panzeria alaschanica)、甘草(Glycyrriza uralensia)、沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)、乳漿大戟(Euphorbia esula)中共分離內(nèi)生真菌449株。以根部最多,
3、其次莖部,葉部最少。合并形態(tài)相同分離物,苦豆子(S.alopecuroides L.)中分離屬最多,為16個屬。除無孢菌外,鐮孢霉屬(Frusarium)為6種沙生藥用植物內(nèi)生真菌共有屬,匐柄霉屬(Stemphylium)、短梗霉屬(Aureobasidium)、芽枝孢屬(cladosporium)、莖點霉屬(Phoma)和毛殼菌屬(Chaetomium)僅在苦豆子中分布。
2、從寧夏靈武白芨灘國家級自然保護區(qū)5個樣區(qū)采集
4、的野生苦豆子植株中共分離出內(nèi)生真菌214株,根部分離內(nèi)生真菌最多,占45.3%。不同樣區(qū)間,以苦豆子、甘草、白草、蒙古冰草、短花針茅等為主的沙生植被草原(Ⅱ和Ⅳ),由于植被覆蓋度高(>50%),伴生植被類型豐富,苦豆子內(nèi)生真菌感染率和分離率最高??喽棺觾?nèi)生真菌群落相似系數(shù)最高的是以叢生小禾草小灌木等植被為優(yōu)勢種群的荒漠草原(Ⅰ)和以強旱生小灌木植被為優(yōu)勢種群的荒漠草原(Ⅲ),兩者均以苦豆子為伴生植被,苦豆子內(nèi)生真菌群落相似系數(shù)CS值為0
5、.76,其它各樣區(qū)間苦豆子內(nèi)生真菌群落相似系數(shù)在0.50~0.72之間。
3、用6種靶標病原菌對214株苦豆子內(nèi)生真菌進行初步拮抗真菌的篩選,有167株(占78.0%)苦豆子內(nèi)生真菌表現(xiàn)出不同程度的抑菌活性,其中樣區(qū)Ⅴ拮抗菌株數(shù)比例最高,達97.5%,其次是樣區(qū)Ⅰ,為89.4%,最低為樣區(qū)Ⅲ,僅為64.7%。拮抗菌株抑菌帶從5mm~21mm不等,顯示出活性菌株的抑菌作用強度不同。其中BKDF3菌株胞外分泌物的抑菌活性最為顯
6、著,對番茄枯萎病菌的抑菌帶寬度達到17.82mm,產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)可以通過硫酸銨鹽析得到,表明抑菌物質(zhì)中含有蛋白質(zhì)。
4、用薄層色譜法(thin layer chromatography,TLC)對64株具有抑菌活性的內(nèi)生真菌菌株進行產(chǎn)喹諾里西啶堿菌株的篩選,并對其進行初步鑒定。結果表明5株苦豆子內(nèi)生真菌菌株發(fā)酵液層析帶與苦豆子總堿的層析帶遷移率相當,初步判定為產(chǎn)喹諾里西啶生物堿菌株,經(jīng)形態(tài)學鑒定,5株菌株分屬于卵形孢霉屬(
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