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![豬致病性鏈球菌快速檢測方法的建立及應用.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/b060c37f-9c79-4112-8592-e893c5de7215/b060c37f-9c79-4112-8592-e893c5de72151.gif)
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文檔簡介
1、本研究從33例臨床癥狀疑似豬鏈球菌感染豬的全血及內臟器官中分離出16株球菌,經過形態(tài)學檢查、溶血試驗、生化試驗、動物試驗鑒定出11株具有致病性的豬鏈球菌。為了對豬鏈球菌進行快速檢測和分型,針對豬鏈球菌谷氨酸脫氫酶蛋白(GlutamateDehydrogenase,gdh)基因、2型特異的莢膜多糖(capsular polysaccharide,cps2J)、溶菌酶釋放蛋白(muramidase-released protein,mrp)
2、、胞外蛋白因子(extracellular protein factor,ef)基因、9型特異的gdh、cps9H基因和1型cpslI基因、7型cps7基因,分別建立了豬鏈球菌屬特異性PCR檢測方法、2型多重PCR檢測方法、9型多重PCR檢測方法和1型、7型、9型多重PCR檢測方法以及豬鏈球菌9型TaqMan熒光定量PCR檢測方法(TaqmanFQ-PCR),并對分離的33株細菌分別進行了檢測。結果顯示,屬特異性PCR檢測11株豬鏈球菌
3、均為gdh陽性,2型多重.PCR.檢測11個gdh陽性菌株均為陰性,9型多重PCR檢測11個gdh陽性菌株3個為陽性,豬鏈球菌9型TaqMan熒光定量PCR檢測11個gdh陽性菌株3個為陽性,1型、7型、9型多重PCR檢測11個gdh陽性菌株3個為豬鏈球菌9型陽性,且與9型TaqMan熒光定量PCR檢測結果一致。其中,FQ-PCR方法檢測靈敏度比常規(guī)PCR高100倍,可達1拷貝/μ L,而且特異性高、重復性好,對pGEX-T-cps9H
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