1、以團(tuán)頭魴為研究對(duì)象，以酪蛋白和明膠為蛋白源、糊精為糖源、大豆油為脂肪源，配制維生素D3添加量分別為0，500，1000，2000，4000，8000IU/kg的六組試驗(yàn)日糧。選擇健康，規(guī)格、重量基本一致(初均重20.60±0.15g)的團(tuán)頭魴隨機(jī)分為六組，每組四個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20尾魚。在可控溫循環(huán)流水圓形蓄養(yǎng)槽(規(guī)格為(φ)820×700mm)內(nèi)進(jìn)行養(yǎng)殖，團(tuán)頭魴馴養(yǎng)15天后用對(duì)照組日糧投喂10天，魚體稱重，采集樣品作為初始數(shù)據(jù)，然后開

2、始分組投喂，進(jìn)行為期90天的生長(zhǎng)試驗(yàn)，分別在投喂45天和90天后采集樣品。
　　 1.維生素D3對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)性能的影響。團(tuán)頭魴攝食不添加維生素D3的飼料，表現(xiàn)出生長(zhǎng)不良，游動(dòng)緩慢，體色較淺，頭蓋骨透明、薄而易碎等缺乏癥;與無(wú)維生素D3組相比，投喂45天后2000IU/kg維生素D3組顯著提高了團(tuán)頭魴的增重率和特定生長(zhǎng)率，降低了餌料系數(shù)。投喂90天后維生素D3缺乏的試驗(yàn)組增重率和特定生長(zhǎng)率顯著降低，餌料系數(shù)升高。體成分分析表明:魚

3、體灰分和鈣含量以及肌肉中粗灰分隨著維生素D3添加量的升高而顯著增加，與無(wú)維生素D3組相比，500IU/kg和1000IU/kg維生素D3組顯著提高了血清中鈣和磷含量。顯著降低了血清中甘油三脂(TG)的濃度，2000IU/kg維生素D3組顯著提高了血清中胰島素(Ins)含量。由試驗(yàn)結(jié)果可知團(tuán)頭魴飼料中維生素D3的添加量為500IU/kg可以防止缺乏癥的發(fā)生，添加量1000-2000IU/kg可以促進(jìn)魚體生長(zhǎng)。
　　 2.維生素D3

4、對(duì)團(tuán)頭魴免疫、抗氧化以及肝臟中HSP70 mRNA基因表達(dá)的影響。通過測(cè)定團(tuán)頭魴血清非特異性免疫指標(biāo)、肝臟組織中抗氧化指標(biāo)以及皮質(zhì)醇水平和肝臟中HSP70 mRNA的表達(dá)水平來評(píng)價(jià)飼料中不同水平的維生素D3對(duì)團(tuán)頭魴免疫、抗氧化和抗應(yīng)激性能的影響，試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)開始時(shí)各試驗(yàn)組各項(xiàng)指標(biāo)均處于同一水平無(wú)顯著差異，隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長(zhǎng)團(tuán)頭魴各項(xiàng)血液免疫指標(biāo)和肝臟抗氧化指標(biāo)均呈上升趨勢(shì)。與對(duì)照組相比，1000IU/kg和2000IU/kg試驗(yàn)組

5、不同程度的提高了團(tuán)頭魴血清中堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、補(bǔ)體C4、和白細(xì)胞的呼吸爆發(fā)活性以及肝臟組織中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶活性(POD)和肝臟組織中HSP70 mRNAs的表達(dá)水平，降低了谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性和皮質(zhì)醇含量。由以上試驗(yàn)結(jié)果可知日糧中維生素D3在1000IU/kg-2000IU/kg的添加范圍內(nèi)有利于提高團(tuán)頭魴的非特異性免疫能力、抗氧化能力和應(yīng)激蛋白的表達(dá)。
　　 3.

6、維生素D3對(duì)團(tuán)頭魴感染嗜水氣單胞菌后血液和肝臟生理生化指標(biāo)的影響。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，經(jīng)腹腔注射感染嗜水氣單胞菌，并在攻毒前后檢測(cè)團(tuán)頭魴血液和肝臟的生化指標(biāo)，另從各蓄養(yǎng)槽中取10尾魚進(jìn)行同樣的攻毒試驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)攻毒后各時(shí)間點(diǎn)團(tuán)頭魴的累積死亡率。與對(duì)照組相比，2000IU/kg和4000IU/kg試驗(yàn)組不同程度的提高了團(tuán)頭魴血清中堿性磷酸酶、總蛋白、白蛋白、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4以及肝臟組織中超氧化物歧化酶，過氧化物酶活性和總抗氧化能力(T-AOC)

7、，降低了谷草轉(zhuǎn)氨酶活性、皮質(zhì)醇含量。感染后的累積死亡率顯示2000IU/kg試驗(yàn)組團(tuán)頭魴的累積死亡率最低。由以上試驗(yàn)結(jié)果可知，日糧中維生素D3在2000IU/kg和4000IU/kg的添加范圍內(nèi)有利于提高團(tuán)頭魴的免疫、抗氧化能力，日糧中維生素D3添加量為2000IU/kg時(shí)有利于降低病原感染后的死亡率。
　　 4.高劑量的維生素D3對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)、非特異性免疫以及肝臟和腸道超微結(jié)構(gòu)的影響。以團(tuán)頭魴為研究對(duì)象，以酪蛋白和明膠為蛋白源

8、、糊精為糖源、大豆油為脂肪源，配制維生素D3添加量分別為2000，200000IU/kg的兩組試驗(yàn)日糧。選擇健康，規(guī)格、重量基本一致(初均重20.60±0.15g)的團(tuán)頭魴隨機(jī)分為2組，每組四個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20尾魚。在可控溫循環(huán)流水圓形蓄養(yǎng)槽(規(guī)格為(φ)820×700mm)內(nèi)進(jìn)行養(yǎng)殖，團(tuán)頭魴馴養(yǎng)15天后用對(duì)照組日糧投喂10天，魚體稱重，采集樣品作為初始數(shù)據(jù)，然后開始分組投喂，并在45天和90天后采集樣品。隨后從各蓄養(yǎng)槽中取10尾魚經(jīng)

9、腹腔注射感染嗜水氣單胞菌，統(tǒng)計(jì)攻毒后各時(shí)間點(diǎn)魚的累積死亡率。由試驗(yàn)結(jié)果可知，與正常組相比高劑量的維生素D3對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)指標(biāo)、魚體成分以及各項(xiàng)血液生化指標(biāo)，均有不同程度的下降。但各項(xiàng)指標(biāo)間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異，說明團(tuán)頭魴對(duì)200000IU/kg維生素D3有一定耐受性。但是高劑量維生素D3降低了團(tuán)頭魴的免疫和抗氧化指標(biāo)，并對(duì)肝細(xì)胞和腸道的結(jié)構(gòu)形態(tài)有一定影響。與2000IU/kg試驗(yàn)組相比，200000IU/kg試驗(yàn)組顯著降低了團(tuán)頭魴肝臟中