大白菜褐腐病病原菌鑒定及快速鑒定方法研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、大白菜褐腐病主要危害成株大白菜的葉柄,導致大白菜葉柄腐爛,從而影響大白菜的質量及產量。該病是最近幾年發(fā)展起來的病害,所以一直未引起專家和學者的注意。國內外也僅有少數的報道。
   本文研究通過常規(guī)鑒定、分子鑒定、融合群鑒定確定引起天津、哈爾濱兩地的大白菜褐腐病病原菌,并進行生物學特性分析、抗性鑒定方法研究。其研究結果如下:
   1.通過對天津、哈爾濱兩地大白菜褐腐病病株上分離的天津菌株(TJ)、哈爾濱菌株(DB)的菌絲

2、形態(tài)、菌落形態(tài)、菌核形態(tài)進行常規(guī)鑒定,確定大白菜褐腐病病原菌為立枯絲核菌Rhizoctonia solani。
   2.通過對兩菌株進行分子鑒定結果表明:TJ、DB兩菌株的5.8S rDNA-ITS序列分別與GeneBank數據庫中的Rhizoctonia solani isolatITS序列相似性分別為100%、99%。進行系統(tǒng)進化樹分析結果表明:TJ和DB兩菌株與其它立枯絲核菌聚為一類,并且DB菌株為一株新的立枯絲核菌菌株

3、,GenBank登錄JN412624。
   3.融合群鑒定表明,TJ菌株屬于AG-2融合群,DB菌株屬于AG1融合群。
   4.TJ、DB兩菌株生物學特性比較
   (1)天津(TJ)、哈爾濱(DB)兩株大白菜褐腐病病原菌生物學特性相同點是:①在碳源利用方面,兩菌株均是在以淀粉為碳源的查氏培養(yǎng)基上生長最快,在果糖上生長最慢。在氮源利用方面,兩菌株均是在以蛋白胨為氮源時生長最快,在以甘氨酸為氮源時生長最慢。兩菌

4、株菌絲生長最適溫度均為25℃,最適pH值為7,最適光照為12h。②兩菌株菌核形成方面,在以可溶性淀粉為碳源生長時最先形成氣生菌核,且兩菌株在以蔗糖為碳源時形成的氣生菌核量均是最多。③在以硫酸銨為氮源時最先形成氣生菌核,氣生菌核量均是硫酸銨最多。④兩菌株半埋式菌核形成量均是蔗糖最多,葡萄糖和可溶性淀粉次之。兩菌株均在25℃時氣生菌核和半埋式菌核量最多。⑤兩菌株均在pH7時氣生菌核和半埋式菌核量最多,pH5時氣生菌核量均是最少。⑥兩菌株均是

5、在12h光照時氣生菌核和半埋式菌核量最多,24h光照時氣生菌核和半埋式菌核量最少。菌絲致死溫度均是42℃。
   (2)天津(TJ)、哈爾濱(DB)兩株大白菜褐腐病病原菌生物學特性不同點是:①在以可溶性淀粉、葡萄糖為碳源時,DB菌株生長速率較快,以果糖為碳源時,TJ菌株生長速率較快。②TJ菌株在以硝酸鉀為氮源時最先形成半埋式菌核,且形成半埋式菌核量硝酸鉀最多;DB菌株在以硝酸銨為氮源時最先形成半埋式菌核,且以硝酸銨為氮源時半埋式

6、菌核最多。③TJ菌株半埋式菌核量及氣生菌核量在29℃時均是最少,而DB菌株則是在21℃時半埋式菌核量最少,氣生菌核量則是29℃時最少。④在同一條件下生長時DB菌絲生長速率快于TJ菌株。⑤在相同條件下生長時菌核形成速度及形成量均是TJ菌株快于并且大于DB菌株。⑥TJ菌株菌核46℃致死,而DB菌株菌核則是48℃致死。
   5.創(chuàng)建了一套大白菜對褐腐病抗性的快速鑒定方法。通過對不同品種的致病規(guī)律的研究,表明以菌餅為接種物其致病速率快

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