MALDI-TOFMS技術快速鑒定病原菌的應用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  基質輔助激光解吸/電離飛行時間質譜(Matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技術是一種軟電離新型有機質譜,可在幾分鐘內對不同種類的病原菌進行鑒定,和以往病原菌鑒定方法相比,在鑒定速度上有了質的突破。本研究利用MALDI-TOF MS與全自動微生物生化鑒定儀Vitek2對本實驗室69

2、0株病原菌進行鑒定,以探討MALDI-TOF MS在病原菌鑒定診斷方面的優(yōu)勢與不足,為MALDI-TOF MS臨床應用提供理論支持和實驗依據。
  方法:
  分離深圳市人民醫(yī)院檢驗科微生物實驗室從2014年5月至2014年10月經臨床標本培養(yǎng)出的690株病原菌;挑取培養(yǎng)基中單個菌落進行革蘭氏染色、觀察菌落形態(tài);采用Vitek MS和Vitek2對菌株進行鑒定,Vitek MS與Vitek2鑒定結果不一致的菌株進行16S r

3、RNA基因序列測定分析或ITS2基因序列測定分析;比較Vitek MS與Vitek2對各類病原菌鑒定到種、屬水平的準確率。
  結果:
  分離培養(yǎng)的菌株經涂片染色可初步鑒定為革蘭陰性菌的有356株,革蘭陽性菌的有241株,類酵母菌有93株。經Vitek MS與Vitek2對690株菌進行鑒定,共568株細菌鑒定結果一致,其中包括革蘭陰性菌348株,革蘭陽性菌220株;共有29株細菌兩種方法鑒定結果不一致;對93株類酵母菌進

4、行鑒定,共有76株類酵母菌鑒定結果一致,17株類酵母菌鑒定結果不一致;對結果不一致細菌采用16S rRNA基因序列測定進行分析,發(fā)現這29株細菌中,Vitek MS屬水平上的準確率為89.65%(26/29),種水平上的準確率為72.41%(21/29),Vitek2屬水平上的準確率為48.28%(14/29),種水平上的準確率為6.90%(2/29),Vitek MS在屬水平及種水平的鑒定準確率均顯著高于 Vitek MS(P<0.0

5、1);對結果不一致的類酵母菌采用ITS2基因序列測定分析,發(fā)現這17株類酵母菌中,Vitek MS的準確率為100%(17/17),Vitek2為0%(0/17)。對93株類酵母菌鑒定Vitek MS的準確率為100.00%(93/93),Vitek2準確率為81.72%(76/93),Vitek MS對類酵母菌的鑒定準確率顯著高于Vitek2(P<0.01)。
  結論:
  MALDI-TOF MS技術在病原菌鑒定中的準

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