大豆疫霉Rho GTPase蛋白PsRac1的功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、大豆是世界上重要的經(jīng)濟(jì)農(nóng)作物,大豆疫霉(Phytophthora sojae)侵染大豆而引起幼苗猝死和成株的根腐病是世界大豆生產(chǎn)上的主要病害之一,每年給世界的大豆產(chǎn)業(yè)帶來巨額經(jīng)濟(jì)損失。大豆疫霉通過感受性激素、外界溫度、濕度及條件的變化而進(jìn)入不同的生活周期。在侵染寄主的過程中通過感知寄主而分泌大量的降解酶、壞死蛋白、蛋白酶抑制劑等效應(yīng)因子以達(dá)到成功侵染寄主的目的。因此研究大豆疫霉如何感受外界的信息及信號傳導(dǎo)機(jī)制、效應(yīng)因子的分泌機(jī)制可以為防

2、止病害的發(fā)生和擴(kuò)展提供理論依據(jù)。但由于傳統(tǒng)的、在其他生物中運用成熟的基因敲除等分子遺傳操作技術(shù)不能運用在大豆疫霉中,因此對大豆疫霉的生長發(fā)育規(guī)律及致病性機(jī)理了解的相對較少。隨著大豆疫霉全基因組數(shù)據(jù)、轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的不斷公布及完善,利用基因功能研究技術(shù)來分析大豆疫霉的生長發(fā)育規(guī)律及致病性機(jī)理就顯得尤為重要。
   大豆疫霉Rho GTPase家族蛋白的生物學(xué)預(yù)測及轉(zhuǎn)錄分析。Rho GTPase家族蛋白是Ras超家族小G蛋白最主要成員,

3、在真核生物中極為保守,參與胞極性、細(xì)胞運動、細(xì)胞形狀、細(xì)胞間及細(xì)胞-基質(zhì)互作等多個信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。本研究通過生物信息學(xué)方法從大豆疫霉全基因組數(shù)據(jù)庫中挖掘出了一個Rho GTPase家族蛋白,命名為PsRac1,通過與其它真核生物的同源性比較,分析了基因的結(jié)構(gòu)特征。利用qRT-PCR等技術(shù)分析了大豆疫霉中PsRac1生活史及侵染各個階段的轉(zhuǎn)錄情況,為后續(xù)功能基因研究提供了思路,也為大豆疫霉防治及新的藥物靶標(biāo)篩選提供了理論基礎(chǔ)。
  

4、 大豆疫霉PsRac1參與調(diào)控大豆疫霉的生長發(fā)育和致病性。游動孢子具有趨化性的特點,通過感受植物表面產(chǎn)生的物理或化學(xué)信號然后接近寄主、休止、萌發(fā)從而成功侵染寄主。利用PEG-CaCl2介導(dǎo)的大豆疫霉遺傳轉(zhuǎn)化沉默PsRac1得到三個沉默轉(zhuǎn)化子。表型分析表明:PsRac1沉默突變體的生長速率下降,休止孢萌發(fā)形成的菌絲生長緩慢且有一定比例的不分枝,突變體頂端囊泡分布減少,而且突變體致病性喪失。PsRac1的沉默突變體細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)沒有影響,同時

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