馬鈴薯脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)基因在番茄中超表達(dá)效應(yīng)的研究.pdf_第1頁
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1、抗壞血酸(L-ascorbic acid,AsA)即維生素C,是一種普遍存在于植物組織的小分子抗氧化物質(zhì),在生物體中具有重要的代謝功能和抗氧化作用。AsA是人類必需的重要維生素,由于人體缺乏合成AsA的能力,必須從食物中獲得,而植物為人類提供了主要的抗壞血酸來源??箟难峒捌浯x相關(guān)酶類能夠清除環(huán)境脅迫產(chǎn)生的活性氧,從而在植物抵抗環(huán)境脅迫中起著重要作用。通過調(diào)控植物抗壞血酸生物合成與代謝相關(guān)酶基因的表達(dá),可以提高抗壞血酸的含量,從而增加

2、植物產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,增強(qiáng)植物對(duì)逆境脅迫的抗性。
   脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)是植物抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)中的關(guān)鍵酶,催化還原態(tài)谷光甘肽還原脫氫抗壞血酸(DHA),使DHA還原為還原態(tài)的抗壞血酸。本研究將馬鈴薯的DHAR兩個(gè)同工酶基因DHAR1,DHAR2導(dǎo)入番茄使其超表達(dá),研究其在番茄AsA代謝及逆境脅迫下的功能。主要結(jié)果如下:
   1.將馬鈴薯DHAR1和DHAR2正義表達(dá)載體,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化番茄。通過P

3、CR及熒光定量PCR的方法對(duì)帶卡那抗性的轉(zhuǎn)基因植株檢測(cè),結(jié)果證明成功獲得了轉(zhuǎn)正義DHAR1和DHAR2基因的番茄植株。
   2.DHAR1超表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株葉片和果實(shí)的DHAR活性、AsA含量及AsA/DHA均比野生型顯著增加。DHAR2超表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株葉片的DHAR活性、AsA含量及AsA/DHA顯著增加,但果實(shí)中上述指標(biāo)沒有顯著變化,表明DHAR2僅在含葉綠體的器官中表達(dá),其在葉片中的超表達(dá)未影響果實(shí)DHAR活性和AsA

4、含量。
   3.DHAR1和DHAR2的超表達(dá)均能提高番茄葉片中葉綠素含量和葉片光合速率。說明DHAR的超表達(dá)對(duì)穩(wěn)定植株葉綠素,增強(qiáng)光合作用有重要作用。
   4.超表達(dá)DHAR1,DHAR2基因植株對(duì)鹽脅迫和甲基紫精脅迫的抗性有一定程度的提高。在鹽脅迫條件下,超表達(dá)DHAR1,DHAR2基因植株與野生型植株相比,具有更高的發(fā)芽率,株高,莖長(zhǎng)和葉綠素含量。在高濃度甲基紫精氧化脅迫下,轉(zhuǎn)基因植株葉盤壞死現(xiàn)象少于野生型植株

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