1、蘿卜(RaphanussativusL.)是一種重要的一、二年生蔬菜作物，深受人們喜愛(ài)。蘿卜的食用部位是其肉質(zhì)根，營(yíng)養(yǎng)豐富，含有豐富的鉀、碳水化合物、葉酸以及抗壞血酸等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?？箟难?AsA)是一種重要的抗氧化劑，并且在生物體內(nèi)有著多種的生理生化作用。同時(shí)，AsA對(duì)根系生長(zhǎng)發(fā)育也起著重要的作用。AsA不僅與根的不活動(dòng)中心生長(zhǎng)有關(guān)，也會(huì)影響側(cè)根的生長(zhǎng)，同時(shí)參與了根系的向性形成。然而根系中AsA相關(guān)研究相對(duì)匱乏，蘿卜中抗壞血酸合成代

2、謝相關(guān)基因表達(dá)特征研究尚未見(jiàn)報(bào)道。有鑒于此，本研究比較了蘿卜中的AsA含量，并且分析了AsA合成及代謝途徑中關(guān)鍵基因的表達(dá)模式，從轉(zhuǎn)錄水平上研究調(diào)控蘿卜中AsA含量的關(guān)鍵基因，從而為闡明根菜作物AsA累積的分子機(jī)制提供了理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:
　　(1)根據(jù)擬南芥中的相關(guān)保守序列設(shè)計(jì)引物，利用同源克隆法，從蘿卜中分離出4個(gè)抗壞血酸相關(guān)基因，分別命名為RsGMP、RsGME、RsGGP以及RsDHAR，并對(duì)其序列以及翻譯的蛋白質(zhì)進(jìn)

3、行分析。RsGMP的DNA全長(zhǎng)2253bp，cDNA全長(zhǎng)1416bp，其中包含1086bp的ORF，編碼361個(gè)氨基酸;RsGME的DNA全長(zhǎng)2013bp，cDNA全長(zhǎng)1252bp，其中包含1140bp的ORF，編碼379個(gè)氨基酸;RsGGP的DNA全長(zhǎng)2256bp，cDNA全長(zhǎng)1827bp，其中包含1305bp的ORF，編碼434個(gè)氨基酸;RsDHAR的DNA全長(zhǎng)1531bp，cDNA全長(zhǎng)1033bp，其中包含774bp的ORF，編碼

4、257個(gè)氨基酸。以上結(jié)果為進(jìn)一步研究蘿卜累積的分子機(jī)制提供基礎(chǔ)。
　　(2)分析了肉質(zhì)根發(fā)育過(guò)程中根肉與根皮內(nèi)AsA含量的變化，并且利用qRT-PCR技術(shù)研究了16個(gè)AsA相關(guān)基因的表達(dá)模式。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在根皮與根肉中，AsA的含量均隨著蘿卜肉質(zhì)根的生長(zhǎng)發(fā)育而下降。根肉中，GMP、GME以及GalUR的表達(dá)量隨著蘿卜生長(zhǎng)而下降，與AsA的含量變化，呈現(xiàn)相關(guān)性。于此不同的是，根皮中，GMP以及GalDH的表達(dá)量與抗壞血酸的含量變化，呈現(xiàn)

5、相關(guān)性。同時(shí)L-半乳糖途徑是蘿卜中AsA合成的主要途徑，糖醛酸途徑對(duì)蘿卜中的AsA累積也起到一定的作用。以上數(shù)據(jù)推斷出，GMP可能在蘿卜肉質(zhì)根AsA累積中起著重要的作用。
　　(3)比較了在光照處理下蘿卜成熟葉、幼葉、根肉以及根皮4個(gè)部位中AsA含量的變化。同時(shí)，采用RT-PCR技術(shù)，分析了4個(gè)不同部位中AsA合成以及再生途徑中的基因，在光照處理下其表達(dá)量的變化。最后利用qRT-PCR技術(shù)，分析蘿卜成熟葉中AsA合成以及再生途徑中