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![鉬對小鼠腎小管和骨骼肌損傷及細胞骨架蛋白表達的影響.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/622f2baa-ad50-4bb2-92c8-7254aa8faf4a/622f2baa-ad50-4bb2-92c8-7254aa8faf4a1.gif)
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文檔簡介
1、目的:中國洛陽作為亞洲重要鉬礦開采地,富含大量鉬元素的土壤會對當?shù)氐哪敛?、家畜產生一定的影響,并且通過食物鏈的富集作用引起動物Mo中毒,因此研究Mo對動物的影響就顯得尤為必要。鉬作為動物體必需的微量元素,在動物機體的生長和代謝過程中發(fā)揮著重要的作用。機體攝入過量的鉬可導致鉬中毒的發(fā)生,從而對動物體的免疫功能、泌尿功能和生殖功能等造成損傷。目前,國內外關于鉬中毒的研究主要集中于動物體的免疫和生殖系統(tǒng)的研究,而關于 Mo對體外培養(yǎng)小鼠骨骼肌
2、細胞(SMC)和腎小管上皮細胞(RTEC)的毒性影響卻未見報道。
方法:本試驗選用3日齡健康小鼠,無菌取出小鼠腎臟和骨骼肌組織進行原代細胞培養(yǎng),待細胞生長穩(wěn)定后,向細胞添加含Mo無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h, Mo的最終濃度分別為0、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L。倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化;MTT法測定 Mo對細胞活力的影響;用試劑盒測定細胞內超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、丙二醛(MDA)、總抗氧
3、化能力(T-AOC),同時測定培養(yǎng)基內乳酸脫氫酶(LDH)含量;采用實時熒光定量 PCR技術,對骨架蛋白α-肌動蛋白(α-actin)、β-肌動蛋白(β-actin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA的表達進行測定;采用免疫印記技術(Western Blot),對骨架蛋白α-actin、β-actin和 Vimentin蛋白含量的變化進行測定。
結果:1.通過細胞形態(tài)觀察得出,當細胞培養(yǎng)基中鉬濃度為0.4、0.8 mmol
4、/L時會導致小鼠腎小管上皮細胞間隙增大,且細胞生長緊縮且細長,輪廓逐漸模糊,少數(shù)細胞出現(xiàn)畸形;當細胞培養(yǎng)基中 Mo濃度為0.2、0.4、0.8 mmol/L時會導致小鼠骨骼肌細胞生長緩慢,細胞間隙增大,且細胞形狀隨 Mo濃度的升高,細胞凸起、輪廓明顯,并有少量細胞出現(xiàn)畸形。
2.細胞培養(yǎng)基中鉬濃度為0.8mmol/L時,小鼠腎小管上皮細胞和骨骼肌細胞的活力明顯受到抑制。
2.細胞培養(yǎng)基中鉬濃度為0.4、0.8mmol
5、/L時,可以引起小鼠腎小管上皮細胞和骨骼肌細胞的抗氧化能力下降,受到氧化損傷。
3.細胞培養(yǎng)基中鉬濃度為0.8mmol/L時,原代小鼠腎小管上皮細胞和骨骼肌細胞骨架蛋白α-actin,β-actin,Vimentin mRNA和蛋白合成受到抑制。
結論:本試驗從細胞形態(tài)學、氧化損傷和細胞骨架損傷方面,初步探討了鉬中毒對于骨骼肌細胞和腎小管上皮細胞的損傷機理,證實了高劑量的 Mo能夠引起小鼠腎小管上皮細胞和骨骼肌細胞氧
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