小麥抗寒相關(guān)基因克隆及序列特征分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、低溫傷害不僅會限制農(nóng)作物的栽種范圍,也會造成農(nóng)作物減產(chǎn)。每年全世界因低溫冷害造成的農(nóng)作物損失多達(dá)數(shù)千億元,研究并提高植物抗寒力具有重要的理論意義和現(xiàn)實意義。為了闡明冷誘導(dǎo)基因與小麥幼苗抗寒性的關(guān)系,本文選取來自于全國各個麥區(qū)及部分外引種質(zhì)共260份小麥資源,進(jìn)行了幼苗抗寒性鑒定及冷誘導(dǎo)基因STS檢測。根據(jù)NCBI上公布的24個冷誘導(dǎo)基因的mRNA序列,分別設(shè)計引物對260份材料進(jìn)行擴(kuò)增,結(jié)果表明:Wrab19(登錄號:AF139915)

2、、Wcs19(登錄號:L13437)、Wrab17(登錄號:AF255053)三個冷誘導(dǎo)基因與小麥抗寒性有一定關(guān)聯(lián),主要結(jié)果如下:
   1.實驗室抗寒性鑒定結(jié)果表明,260個品種的抗寒性分布廣泛,品種間差異極顯著,所有品種的抗寒性變幅為0.0~1.0,表現(xiàn)出較為明顯的表型差異。
   2.利用所設(shè)引物對Wrab19基因進(jìn)行擴(kuò)增時,表現(xiàn)出較好的多態(tài)性,260份材料中,133個品種擴(kuò)增出兩條帶,長度分別為690bp和 12

3、00bp;127個品種擴(kuò)增出一條帶,長度為690bp。隨機(jī)挑選4個抗寒性不同的品種進(jìn)行測序,品種名稱為Serra、02Y151、宿9908、CP93181115,其中前兩個品種序列與目的序列基本一致,而后兩個品種序列在222bp處多出一段33bp的序列,推測可能是等位基因。
   3.利用引物對260份材料進(jìn)行wcs19基因檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該引物特異性較好,但在品種間沒有多態(tài)性,260份材料均檢測出wcs19基因。進(jìn)一步的序列分

4、析表明,wcs19基因DNA序列含有一段121122bp的內(nèi)含子,且該內(nèi)含子序列中包含一個SNP,即,內(nèi)含子序列+9bp 處G堿基的插入和缺失,此內(nèi)含子及內(nèi)含子中的SNP與幼苗抗寒性的關(guān)系還需進(jìn)一步研究確定。
   4.利用所設(shè)引物對wrab17基因進(jìn)行擴(kuò)增時,引物擴(kuò)增特異性較好,預(yù)計目標(biāo)片段468bp,但實際擴(kuò)增出610bp的片段,同時在品種間沒有出現(xiàn)多態(tài)性,260份材料均檢測出wrab17基因。隨機(jī)選取兩個抗寒性不同的品種進(jìn)

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