柞蠶HSP70基因的克隆和序列分析.pdf_第1頁(yè)
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1、熱休克蛋白(heatshockprotein)是在從細(xì)菌到哺乳動(dòng)物中廣泛存在一類(lèi)熱應(yīng)急蛋白質(zhì)。當(dāng)有機(jī)體暴露于高溫時(shí),就會(huì)激發(fā)合成此種蛋白來(lái)保護(hù)有機(jī)體自身,發(fā)揮著重要的生物學(xué)功能。HSP70是熱休克蛋白家族中最重要的一員,被稱(chēng)為主要熱休克蛋白,由HSP70基因家族編碼。目前熱休克蛋白在果蠅、搖蚊、煙草夜蛾、美洲大蠊、飛蝗、蜜蜂、褐飛虱等昆蟲(chóng)中已得到了廣泛研究,部分功能也已被證實(shí)。然而熱休克蛋白70基因的結(jié)構(gòu)及其功能尚不清楚。
  

2、 柞蠶(Antheraeapernyi),屬鱗翅目大蠶蛾科昆蟲(chóng),因喜食柞樹(shù)葉得名,繭可繅絲,主要用于織造柞絲綢?;谔骄孔跣Q體內(nèi)熱休克蛋白70基因在柞蠶體內(nèi)的分子作用機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR方法首次克隆獲得了柞蠶熱休克蛋白70基因的基因序列(GenBank登錄號(hào):GU945199),該片段的序列長(zhǎng)1905bp。生物信息學(xué)分析表明,該序列共編碼634個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)蛋白的等電點(diǎn)和分子量大小分別為5.62和69.5kD,且柞蠶HSP70氨

3、基酸序列具有昆蟲(chóng)HSP70的保守性結(jié)構(gòu)特征。序列分析表明,柞蠶HSP70與與天蠶(Antheraeayamamai,AB179657.1)、家蠶(Bombyxmori)、甘藍(lán)夜蛾(Mamestrabrassicae)、棉鈴蟲(chóng)(Heliothisviriplaca)、甜菜夜蛾(Spodopteraexigua)、煙草天蛾(Manducasexta)、膜翅目寄生蜂(Cotesiarubecula)、大鼠(Rattusnorvegicus)、

4、斑馬魚(yú)(Daniorerio)、果蠅(Drosophilamelanogaster)、人(Homosapiens)HSP70等11個(gè)物種的HSP70基因核苷酸序列的同源性分別為95.7%、78.5%、76.1%、77.3%、76.6%、74.7%、1、65.7%、66.7%、64.2%、45.2%;氨基酸序列同源性分別為98.11%、92.9%、2、88.3%、91.3%、88.3%、72.7%、73.3%、72.3%、71.5、31.

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