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![辣椒多聚半乳糖醛酸酶可逆性抑制蛋白(PGIP)基因轉化小麥、玉米及抗性評價.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/df38ea54-5dde-40c6-95d5-c454203eec54/df38ea54-5dde-40c6-95d5-c454203eec541.gif)
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文檔簡介
1、多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polygalacturonaseinhibitingprotein,PGIP)是一種特異性蛋白,能夠非競爭性地抑制病原菌的內(nèi)切多聚半乳糖醛酸酶(endopolygalacturonase,endo-PG)活性,增強植物的抗病性。研究發(fā)現(xiàn)多種植物體內(nèi)含有PGIP基因,這類基因承受了較小的進化壓力,進化速率較快,致使有些植物如禾谷類作物的PGIP基因已經(jīng)丟失,而多數(shù)茄科類作物留了這類基因。本研究主要是將PGIP基
2、因轉入到禾本科作物小麥和玉米基因組中,以期獲得轉PGIP基因的小麥玉米植株,從而能對真菌病害如小麥赤霉病、玉米紋枯、玉米大小斑病等產(chǎn)生抗性。本研究的主要結果和結論如下:
1、植物表達載體pCBUPGIP構建
將克隆出的PGIP基因和含有Bar基因的pCAMBIA-Bar-Ubi載體雙酶切后用T4連接酶連接構建植物表達載體pCBUPGIP,并用PCR鑒定。成功構建載體后轉入大腸桿菌進行擴大培養(yǎng)提取質粒,純化后,
3、測定濃度并稀釋至1.0ug/L用于基因槍法轉化小麥;同時采用液氮凍融法將載體轉入根癌農(nóng)桿菌LBA4404,轉化玉米。
2、轉基因小麥玉米種質材料的獲得
通過優(yōu)化小麥玉米再生體系,建立了高效再生體系,并成功獲得小麥品種揚麥158的轉化再生株、玉米自交系A188和齊319的轉化再生株。提取轉化株的總DNA,用PGIP兩端的引物擴增DNA樣品,均得到了660bp的目的片段。
3、轉化株進行真菌病害抗病
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