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文檔簡介
1、由致病疫霉[Phytophthorainfestans(Mont.)deBary]引起的馬鈴薯晚疫病,是馬鈴薯的一種毀滅性病害。植物對病原菌識別并作出防御反應是植物先天免疫的特征,根據(jù)不同的識別物質和機制將植物先天免疫分為病原相關分子模式(PAMPs)誘發(fā)的免疫(PTI)和病原效應子(Effector)誘發(fā)的免疫(ETI)。PTI作為植物抵抗病原菌入侵的第一道防線在植物的抗病反應中起到重要作用。因PTI無差別抵御各種病原菌的入侵而表現(xiàn)為
2、廣譜抗性,因此對PTI作用機制的研究對馬鈴薯抗病育種具有重要的應用價值。SERK3在模式植物擬南芥中作為PTI關鍵信號傳導組份在抗病免疫應答中起著重要作用。在本氏煙草中沉默其同源(orthologous)基因NbSERK3后本氏煙草晚疫病抗性明顯下降。前期研究在從馬鈴薯上克隆得到StSERK3A/BAK1基因。本試驗旨在通過分析StSERK3A/BAK1基因的表達模式,轉基因株系的抗病性鑒定,蛋白互作分析等內(nèi)容初步探尋StSERK3A/
3、BAK1基因在馬鈴薯PTI途徑中的作用。主要研究結果如下:
1.生物和非生物脅迫誘導基因表達結果分析顯示,馬鈴薯葉片受到晚疫病菌、SA、MeJA、ETH和機械傷害脅迫處理時StSERK3A/BAK1基因表達水平基本維持在一定范圍內(nèi),無明顯的上調或下調現(xiàn)象,說明該基因在馬鈴薯中屬于組成型表達基因。
2.獲得了超量表達和沉默StSERK3A/BAK1的鄂馬鈴薯3號(E3)和本氏煙草轉基因株系。馬鈴薯離體葉片上接種晚疫病菌
4、抗性鑒定表明,與對照相比,超量株系的晚疫病抗病性沒有明顯提升,但沉默株系病斑面積較大和擴展速度較快,抗病性明顯下降?;铙w接種PVYN∶O病毒結果表現(xiàn)為干涉株系病癥比超量株系和對照明顯。
3.qRT-PCR分析轉基因株系信號轉導途徑相關基因表達量顯示,在不接種病原菌的情況下SA、JA信號途徑基因表達量沒有明顯的上調或下調表達,而與MAPK途徑和活性氧爆發(fā)相關的基因表現(xiàn)為超量株系上調表達,干涉株系下調表達。
4.利用雙分
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