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1、普通小麥(Triticum aestivum L.,2n=6x=42,AABBDD)是異源六倍體,由A、B、D三個(gè)具有部分同源關(guān)系的染色體組組成。人們通過模擬小麥的起源過程,利用四倍體小麥(T.Turgidum L.,2n=28,AABB)與粗山羊草(Ae.Tauschii,2n=14,DD)雜交,經(jīng)染色體加倍人工合成六倍體小麥,再以此人工合成小麥作為橋梁親本,能更有效地將四倍體小麥或者粗山羊草的優(yōu)異基因轉(zhuǎn)移到普通小麥。同時(shí),人工合成小
2、麥可以用于探索異源多倍化的發(fā)生機(jī)制及發(fā)生后小麥基因組的變異研究。小麥基因組中含有大量的重復(fù)序列,其中簡(jiǎn)單序列重復(fù)序列,即微衛(wèi)星序列(Simple Sequence Repeat,SSR或Microsatllite),是植物基因組的重要組成部分。SSR標(biāo)記的原理就是利用微衛(wèi)星序列重復(fù)單元的多態(tài)性來區(qū)分物種之間的差異,加上SSR標(biāo)記自身的一些優(yōu)點(diǎn),使其成為研究物種遺傳變異及進(jìn)化的重要工具之一。
本研究利用SSR標(biāo)記對(duì)5份來自同
3、一四倍體小麥、不同粗山羊草的人工合成雙二倍體小麥(稱為第一套材料)和5份來自同一粗山羊草、不同四倍體小麥的人工合成雙二倍體小麥(稱為第二套材料)及其合成親本的基因組進(jìn)行比較,分析了異源多倍化對(duì)小麥基因組的影響及SSR對(duì)基因組的作用。獲得以下主要結(jié)果:
(1)在第一套材料中,合成小麥與親本相比發(fā)生變異的比例依次為:G-SSR標(biāo)記是4.6%、EST-SSR標(biāo)記是2.6%、STS標(biāo)記是0;而在第二套材料中,其變異比例依次為:G-
4、SSR標(biāo)記是38.6%、EST-SSR標(biāo)記是11.8%、STS標(biāo)記是0。結(jié)果表明,在異源多倍化作用下,非編碼區(qū)的變異大于編碼區(qū)變異;而且,不同人工合成小麥對(duì)異源多倍化的作用響應(yīng)不同,合成小麥Syn44,Syn98,Syn68的變異較大,可為進(jìn)一步研究異源多倍化作用提供良好材料。
(2)通過對(duì)上述兩套材料中合成小麥及其雙親的全基因組掃描(指包括A、B、D基因組的SSR標(biāo)記),兩套材料都出現(xiàn)了雙親中的微衛(wèi)星擴(kuò)增條帶在合成小麥中
5、消除的現(xiàn)象,消除位點(diǎn)頻率分別為2.9%和6.5%。因此序列消除可能是異源多倍化過程中一個(gè)比較普遍的現(xiàn)象。
(3)通過對(duì)31對(duì)SSR引物擴(kuò)增產(chǎn)物的大量測(cè)序表明,擴(kuò)增片段的差異主要是由簡(jiǎn)單序列重復(fù)區(qū)重復(fù)單元數(shù)目的增加或減少引起的,而引物兩端的側(cè)翼區(qū)變化很小,相對(duì)比較保守。微衛(wèi)星序列在小麥多倍體化過程中是一種非常活躍的堿基序列,因此不同品種(系)間表現(xiàn)出高度多態(tài)性,其本身也許沒有功能基因的作用,但在新物種形成過程中對(duì)穩(wěn)定功能基因
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