一個油菜菌核病抗病相關基因功能初步分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、油菜(Brassicanapus)是世界上主要的油料作物和重要的經(jīng)濟作物,在經(jīng)濟和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有重要作用。核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum)引起的油菜菌核病是油菜生產(chǎn)上的重要病害,但至今未發(fā)現(xiàn)免疫或者是高抗品種。小繁縷(StellariaapetalaUcria)是一種常見的田間雜草,對核盤菌表現(xiàn)免疫性。研究核盤菌與小繁縷非寄主互作、與油菜寄主互作的分子機制,尋找抗病或者致病相關基因,對菌核病的防治有著重要的意義。

2、Sspgld提多聚半乳糖醛酸酶的一種,在核盤菌侵染寄主早期發(fā)揮作用的一個重要致病因子。本課題組將sspgld作為誘餌,利用酵母雙雜交方法篩選小繁縷cDNA文庫,篩選到1個膜蛋白(命名為ppn20)。經(jīng)實驗證明,ppn20是一個G蛋白偶聯(lián)受體,小繁縷在受到核盤菌誘導后表達量明顯增加。本研究主要致力于研究ppn20的功能,利用農(nóng)桿菌介導法對油菜與煙草進行轉(zhuǎn)化,獲得轉(zhuǎn)基因植株,通過分子檢測及表型分析推斷ppn20基因的功能。我們將攜帶有ppn

3、20基因的植物表達載體ppn20-pBinplus轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌后用農(nóng)桿菌介導法對甘藍型油菜進行遺傳轉(zhuǎn)化,經(jīng)過kan+抗性篩選,成功獲得10株陽性植株,其中7株成活;對陽性植株進行PCR和RT-PCR檢測,發(fā)現(xiàn)目的基因成功導入油菜植株,大部分能順利表達;對幼苗進行接種表型鑒定,結(jié)合分子鑒定結(jié)果,發(fā)現(xiàn)表達ppn20基因的植株均未能明顯抵抗核盤菌的侵染或擴展,與非轉(zhuǎn)基因的對照植株對核盤菌抵抗能力無明顯差別。轉(zhuǎn)基因煙草對核盤菌的抵抗能力與對照相似

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