1、花粉萌發(fā)和花粉管生長是種子植物有性生殖的重要環(huán)節(jié)之一。由于花粉在植物有性生殖過程中的特殊作用和花粉管極性生長的特性,多年來一直是研究細胞分裂、分化及細胞識別等重要生命過程的模型。目前對花粉管極性生長的信號轉導等方面的研究已取得較大進展,但對花粉萌發(fā)過程中蛋白質組的變化及蛋白質的鑒定的研究仍較少。
　　 本研究以玉米花粉為材料,運用雙向電泳結合串聯(lián)質譜技術鑒定了玉米花粉萌發(fā)過程中差異表達的蛋白質,并對差異蛋白進行分析。主要研究結果

2、如下:
　　 1.建立了一套適合玉米花粉雙向凝膠電泳體系。本研究采用pH4-7的11cm線性IPG預制膠條進行第一向等電聚焦,低電壓主動水化上樣,聚焦總量達到55000vhr。第二向使用12％SDS.PAGE膠。電泳后使用考馬斯亮藍R350染色。此體系得到的雙向電泳圖譜清晰,蛋白質點形狀規(guī)則,重復性好,能較好地滿足后續(xù)串聯(lián)質譜鑒定要求。
　　 2.選擇成熟花粉(PO)和離體萌發(fā)1小時花粉(P1)進行蛋白質組學分析。在雙向

3、凝膠上得到470個蛋白質點,其中28個點的表達豐度在P0和P1間差異較為顯著。鑒定了21種蛋白質,其中13個表達豐度上升,主要包括花粉管壁的修飾(果膠甲酯酶,高爾基體結合蛋白)、肌動蛋白細胞骨架組織(肌動蛋白)、能量代謝(ATP酶亞基1、異檸檬酸脫氫酶、蘋果酸脫氫酶、焦磷酸酶、葡萄糖-1-磷酸酯尿甙基轉移酶等)、信號轉導(RabGDP解離抑制因子、腺苷激酶)、蛋白質的折疊與加工(線粒體加工肽酶、蛋白質二硫化物異構酶)等；8個蛋白質的表達