1、關于雙殼類軟體動物生殖生物學的研究,國內(nèi)外已有一些報道。目前,對于性別、生殖的分子研究主要集中在人類和模式生物中,有關于水生生物這方面的研究很少,并且有關池蝶蚌(Hyriopsis schlegeli)性腺發(fā)育與相關蛋白生物學的內(nèi)容還未見報道。作為淡水珍珠育珠的代表,池蝶蚌具有巨大經(jīng)濟價值,研究其性腺發(fā)育與相關蛋白等內(nèi)容可為池蝶蚌種質(zhì)資源保護、優(yōu)良品種培育、人工繁育等提供理論參考和依據(jù)。
　　 本文以池蝶蚌為研究對象,利用石蠟切

2、片、SDS-PAGE、Native-PAGE、排阻凝膠層析、蛋白透析等現(xiàn)代生物學技術對性腺變化形態(tài)學、性腺總蛋白種類、雌雄性腺相關蛋白動態(tài)變化、雄性性腺相關蛋白的純化及其部分性質(zhì)進行了研究,為進一步開展池蝶蚌生殖生物學研究提供依據(jù)。主要結(jié)果如下:
　　 一、池蝶蚌性腺蛋白研究
　　 分別采取石蠟切片和SDS-PAGE電泳對5齡池蝶蚌性腺組織學變化和性腺總蛋白變化進行觀察,分析性腺發(fā)育與蛋白動態(tài)變化的聯(lián)系。池蝶蚌繁殖期和非

3、繁殖期性腺發(fā)生顯著變化,并且雌性個體性腺蛋白水平在不同發(fā)育階段呈現(xiàn)明顯變化。從非繁殖期向繁殖期的過渡中,雌性性腺相關蛋白的表達水平是逐步提高的,并在繁殖期達到最高峰,之后表達量減少并維持在一定水平；雄性性腺相關蛋白的表達水平也呈現(xiàn)周期變化,非繁殖期表達量最大,繁殖期表達量最小。
　　 二、池蝶蚌雄性性腺蛋白部分理化性質(zhì)研究
　　 采用蛋白透析法從成熟池蝶蚌雄性性腺中提取相關蛋白,并初步分析了其理化性質(zhì)。Native-PA

4、GE和SDS-PAGE結(jié)果顯示:其三條蛋白條帶的相對分子量為16.02KDa、14.96 KDa和13.41 KDa；樣品緩沖液中β-巰基乙醇的有無并不影響蛋白條帶,推測其三條蛋白條帶為三種不同蛋白。將純化后的樣品進行Native-PAGE,電泳后的凝膠分別使用蘇丹黑B進行脂蛋白特異性染色和羅丹明B進行磷蛋白特異性染色,并采用考馬斯亮藍染色進行對比,結(jié)果顯示凝膠與這兩種試劑均出現(xiàn)陰性反應,從而說明該三種蛋白不是一種富含脂、磷的大分子蛋白